抑制内源性硫化氢生成加重尿源性脓毒血症肾损伤的炎症反应

发布时间：2017-05-18 10:10

本文关键词：抑制内源性硫化氢生成加重尿源性脓毒血症肾损伤的炎症反应，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立尿源性脓毒症家兔模型,应用胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(DL-Propargylglycine,PAG)抑制内源性硫化氢生成,观察CSE活性的表达及内源性硫化氢生成,比较兔肾组织核因子-κB(NF-κB)及细胞因子IL-6、TGF-β1的表达,明确内源性硫化氢对尿源性脓毒血症肾脏细胞因子表达的影响,探究硫化氢在尿源性脓毒血症肾脏功能保护中的作用机理。方法1、选取32只健康雄性家兔,随即分为4组,每组8只,分别为:control(对照)组;sham(假手术)组;sepsis(尿源性脓毒症)组;PAG(DL-炔丙基甘氨酸)组。2、sepsis组家兔予以结扎一侧输尿管同时向结扎点的近端输注细菌液(大肠杆菌),建立尿源性脓毒血症兔模型;PAG组于造模后向腹腔注射DL-炔丙基甘氨酸(37.5mg/kg),sepsis组腹腔注射等量生理盐水。3、各组按时间点又分为术前、术后12h、24h、36h和48h 5个亚组,按各个亚组观察家兔的肛温(Rectal temperature,RT)、呼吸频率(Respiratory rate,RR)及心率(Heart rate,HR)。4、各时间点(术前、术后12h、24h、36h和48h)采外周静脉血测白细胞数(WBC)、中性粒细胞数(N)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)。5、术后48h取血测血浆H2S浓度,取肾组织检测CSE活性。6、术后48h取各组兔肾标本固定并行HE染色,光学显微镜下观察其组织形态结构改变。Western-blot法测肾组织细胞因子NF-κB、TGF-β1及IL-6的表达。结果1、生命体征:sham组术后48h RT、RR、HR与control组比较,无统计学差异(P0.05);sepsis组各时间点RT、RR、HR均明显高于同时间点control组及sham组,差异有统计学意义(P0.05);PAG组各时间点RT、RR、HR较同时间点sepsis组升高更显著(P0.05)。2、血液检测指标:术后48h sham组家兔WBC、中性粒细胞数、Cr、BUN与control组比较,均无明显差异(P0.05);sepsis组术后WBC、中性粒细胞数、Cr、BUN与control及sham组比较,明显升高,差异有统计学意义(P0.05);PAG组WBC、中性粒细胞数、Cr、BUN较sepsis组升高更显著(P0.05)。3、肾组织CSE活性及血浆H2S含量检测:sham组术后48h肾组织CSE活性及血浆H2S含量与control组之间无明显差异(P0.05);sepsis组肾组织CSE活性及血浆H2S含量与control及sham组比较,均下降,差异有统计学意义(P0.05);PAG组肾组织CSE活性及血浆H2S含量较之sepsis组下降更显著(P0.05)。各组家兔的肾组织CSE活性与血浆H2S含量呈正相关关系,R=0.8505。4、病理学改变:control组和sham组肾组织结构无明显异常;sepsis组肾组织结构紊乱,肾小球形态异常,血管球萎缩、变形,肾小囊扩大明显,肾小管上皮细胞可见水肿、坏死,坏死细胞脱落并阻塞管腔,管腔扩张,肾间质充血、水肿,周围可见大量炎性细胞浸润;PAG组与sepsis组相比较,上述病变加重。5、肾组织NF-κB、IL-6及TGF-β1的蛋白表达(Western-blot法):sham组术后48h肾组织NF-κB、IL-6及TGF-β1的表达与control组比较,均无明显差异(P0.05);sepsis组及PAG组肾组织NF-κB、IL-6、TGF-β1表达均高于control组,有统计学意义(P0.05);PAG组NF-κB、IL-6的表达较sepsis组升高(P0.05),PAG组TGF-β1表达较sepsis组减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论1、成功复制尿源性脓毒血症家兔模型。2、应用PAG可抑制内源性硫化氢的生成,从而加重了尿源性脓毒血症肾损害,其机理可能与上调肾组织NF-κB水平、增加IL-6及减少TGF-β1的表达有关。
【关键词】：内源性硫化氢 尿源性脓毒血症 肾损害 细胞因子 家兔
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R692;R459.7
【目录】：