MiR-21介导丝裂原活化蛋白激酶激酶3低调白介素-6/肿瘤坏死因子-α保护肾脏

发布时间：2023-03-11 00:25

　　第一部分MicroRNA-21-5p靶向调控丝裂原活化蛋白激酶激酶3 目的 验证MicroRNA-21-5p(miR-21-5p)与丝裂原活化蛋白激酶激酶3(MKK3)3’非编码区(3’UTR)结合，证实miR-21-5p与MKK3的靶向调控关系。 方法 1、分别构建MKK33’UTR报告载体(MKK3-3U)及MKK33’UTR突变报告载体(MKK3-3U-M)；化学合成miR-21-5p模拟物(mimics)、miR-21-5p抑制剂(inhibitor)及无意义miR (NC)。 2、分别用NC(NC1组)、mimics(mimic1组)、inhibitor(inhibitor1组)与MKK3-3U共转染人胚肾(HEK293)细胞，双荧光素酶检测仪检测细胞荧光比值。 3、分别用空载质粒(pYr-MirTarge)(对照组)、MKK3-3U(Wt组)、MKK3-3U-M(Mut组)与mimics共转染HEK293，双荧光素酶检测仪检测细胞荧光比值。 4、NC(NC2组)、mimics(mimic2组)、inhibitor(inhibitor2组)分别干预人肾小管上皮(HK-2)细胞...

【文章页数】：126 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
第一部分 MicroRNA-21-5p 靶向调控丝裂原活化蛋白激酶激酶 3
    前言
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 统计学处理
    2 实验结果
        2.1 MKK3 与 miR-21-5p 间靶向关系的预测
        2.2 miR-21-5p 与 MKK3 3’UTR 区结合
        2.3 miR-21-5p 不能与结合位点突变的 MKK3 3’UTR 结合
        2.4 miR-21-5p 在 mRNA 水平下调 MKK3 表达
        2.5 miR-21-5p在蛋白质水平下调 MKK3 表达
    3 讨论
    4 结论
    参考文献
第二部分 缺血再灌注肾损伤模型小鼠 miR-21/丝裂原活化蛋白激酶激酶 3 /白介素-6 /肿瘤坏死因子-α的表达及意义
    前言
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 统计学方法
    2 实验结果
        2.1 各组小鼠血清肌酐水平
        2.2 各组小鼠血尿素氮水平
        2.3 各组小鼠肾脏病理及肾小管间质病理损伤评分
        2.4 各组小鼠肾组织miR-21表达水平
        2.5 各组小鼠肾脏MKK3表达变化
        2.6 各组小鼠肾脏IL-6表达变化
        2.7 各组小鼠肾脏TNF-α表达变化
    3 讨论
    4 结论
    参考文献
第三部分 肾脏缺血预处理上调 miR-21 低调丝裂原蛋白蛋白激酶激酶 3 及下游白介素-6 /肿瘤坏死因子-α保护肾脏
    前言
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 统计学方法
    2 实验结果
        2.1 各组小鼠血肌酐水平
        2.2 各组小鼠血尿素氮水平
        2.3 各组小鼠肾脏病理及肾小管间质病理损伤评分
        2.4 各组小鼠肾组织miR-21表达水平
        2.5 各组小鼠肾脏MKK3表达变化
        2.6 各组小鼠肾脏IL-6表达变化
        2.7 各组小鼠肾脏TNF-α表达变化
    3 讨论
    4 结论
    参考文献
第四部分 结论
综述 MicroRNAs 与急性肾损伤研究进展
    参考文献
致谢
攻读学位期间主要成果



本文编号：3758843