Th3在IgA肾病中的作用及机制探讨
发布时间:2023-03-11 06:50
目的: 探讨获得性调节性Th3细胞在IgA肾病中的作用及机制,为IgA肾病临床治疗策略提供新的思路及理论基础。 方法: 通过体外细胞实验,将等体积均匀悬浮的DAKIKI B淋巴细胞接种于培养板,设阴性对照组(不加任何刺激因子)、实验组(分别加5ng/ml、10ng/ml、15ng/ml、30ng/ml不同浓度的TGF-β1)、阳性对照组(加浓度为10ng/ml IL-4),分组培养3天、7天。采用ELISA双抗体夹心法检测各组细胞培养上清液中IgA1浓度、IgA1低糖基化程度及IgA1唾液酸化程度;采用Real time-PCR技术检测各组B淋巴细胞在不同时间点(12h,72h) C1β3Gal-T半乳糖基转移酶和分子伴侣ComscmRNA表达水平。 结果: (1)细胞上清IgA1浓度测定:ELISA检测结果显示:TGF-β1对B淋巴细胞分泌IgA1成双向调节,在低浓度时(0-10ng/ml)呈正相关性,在高浓度(10-30ng/ml)呈负相关性,3、7天空白组VS各实验组及IL-4组,均P<0.05,有统计学意义。 (2)IgA1低糖基化程度测定:一定浓度的TGF-β1及IL-4均会...
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
目录
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 资料
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要试剂及溶液配制
2.2 方法
2.2.1 技术路线
2.2.2 细胞的复活及处理
2.2.3 提取 3 天、7 天各组细胞上清液用于检测 IgA1 浓度及异常糖基化程度,唾液酸化程度
2.2.4 ELISA 法检测 IgA1 浓度
2.2.5 ELISA 法测 IgA1 糖基化程度,唾液酸化程度
2.2.6 实时荧光定量 Real time -qPCR 检测 C1β3Gal- T 半乳糖基转移酶和分子伴侣 Comsc 基因表达水平
第3章 结果
3.1 Th3 分泌因子 TGF-β1 对 B 淋巴细胞分泌 IgA1 的影响
3.2 Th3 分泌因子 TGF-β1 对 B 淋巴细胞分泌 IgA1 糖基化及唾液酸化的影响
3.3 Real time-PCR 荧光定量各组细胞 C1β3 GAL-T、COMSC 基因表达相对定量
第4章 讨论
4.1 IgA 肾病发病机制
4.2 低糖基化的 IgA1 在 IgA 肾病发生发展中作用
4.3 辅助性 T 细胞与异常糖基化 IgA1 的形成关系
4.4 TGF-β1 在 IgA 肾病发生展中的作用
第5章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
参考文献
本文编号:3759404
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
目录
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 资料
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要试剂及溶液配制
2.2 方法
2.2.1 技术路线
2.2.2 细胞的复活及处理
2.2.3 提取 3 天、7 天各组细胞上清液用于检测 IgA1 浓度及异常糖基化程度,唾液酸化程度
2.2.4 ELISA 法检测 IgA1 浓度
2.2.5 ELISA 法测 IgA1 糖基化程度,唾液酸化程度
2.2.6 实时荧光定量 Real time -qPCR 检测 C1β3Gal- T 半乳糖基转移酶和分子伴侣 Comsc 基因表达水平
第3章 结果
3.1 Th3 分泌因子 TGF-β1 对 B 淋巴细胞分泌 IgA1 的影响
3.2 Th3 分泌因子 TGF-β1 对 B 淋巴细胞分泌 IgA1 糖基化及唾液酸化的影响
3.3 Real time-PCR 荧光定量各组细胞 C1β3 GAL-T、COMSC 基因表达相对定量
第4章 讨论
4.1 IgA 肾病发病机制
4.2 低糖基化的 IgA1 在 IgA 肾病发生发展中作用
4.3 辅助性 T 细胞与异常糖基化 IgA1 的形成关系
4.4 TGF-β1 在 IgA 肾病发生展中的作用
第5章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
参考文献
本文编号:3759404
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