OCT4在顺铂治疗睾丸胚胎癌中的作用

发布时间：2023-04-02 08:53

　　为探讨胚胎转录因子八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)在顺铂治疗睾丸胚胎癌中的作用,采用体外细胞实验评估顺铂对OCT4沉默睾丸胚胎癌细胞株的影响。用500 ng/μL顺铂处理肿瘤细胞后,MTT法检测OCT4沉默/不沉默条件下2012EP和833K-E细胞株的增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力;采用细胞迁移侵袭实验和结晶紫染色法检测细胞侵袭能力;FACS检测细胞周期分布情况;Western blotting分别检测OCT4沉默/不沉默条件下肿瘤发生相关通路中几种关键蛋白的表达水平。结果显示,与对照组相比,顺铂反增不同浓度OCT4沉默细胞的存活率(P<0.01)。经500 ng/μL顺铂处理后,OCT4沉默细胞的增殖能力是对照组的2～3倍(P<0.001),迁移能力是对照组的2倍(P<0.001),侵袭能力则是约1.5倍(P<0.001)。此外,OCT4沉默上调了参与细胞增殖、迁移、转移和细胞周期调控的重要蛋白的表达水平,而OCT4蛋白表达水平与β连环蛋白呈正相关。由此,OCT4可能成为顺铂...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
    1.2 实验
        1.2.1 细胞的培养和转染
        1.2.2 RT-PCR检测
        1.2.3 Western blotting检测
        1.2.4 肿瘤细胞凋亡检测
        1.2.5 MTT检测与药物处理
        1.2.6 细胞侵袭迁移能力检测
        1.2.7 FACS检测
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 OCT4在不同睾丸生殖瘤细胞系中的表达
    2.2 OCT4敲除情况评估
    2.3 不同剂量顺铂对肿瘤细胞的影响
    2.4 顺铂处理对肿瘤细胞增殖的影响
    2.5 顺铂处理对肿瘤细胞迁移和侵袭的影响
    2.6 顺铂处理对肿瘤细胞G1/S细胞周期转变的影响
    2.7 β连环蛋白与OCT4蛋白表达水平的相关性
    2.8 肿瘤发生相关通路中关键蛋白的表达与OCT4表达关系
3 讨论



本文编号：3778934