PHF7在人精子中相互作用蛋白分析

发布时间：2023-05-06 18:15

　　目的筛选人精子中与PHF7相互作用的蛋白质并分析其作用。方法构建质粒表达GST-PHF7融合蛋白,通过GST pull-down实验串联质谱检测人精子中与PHF7特异性结合的蛋白质,进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果利用GST-PHF7诱饵蛋白从人精子细胞总蛋白中成功钓取靶蛋白。经过质谱检测,筛选出人精子中与PHF7特异结合的蛋白75个。GO分析结果表明,这些蛋白在生物学过程上主要富集在蛋白运输和细胞内定位等;在细胞成分上主要富集在细胞器,囊泡和外泌体等;在分子功能上主要富集在结合蛋白质,核酸和酶类等。KEGG分析结果表明,这些蛋白富集在细胞代谢和遗传信息的处理等通路。结论 PHF7与精子内多种蛋白质相互作用,调节蛋白合成,运输和降解及能量代谢等可能是其调节精子发生的机制。

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【文章目录】：
材料与方法
    一、GST-PHF7表达载体的构建
    二、GST-PHF7融合蛋白的表达与纯化
    三、精子总蛋白提取
    四、GST pull-down实验
    五、质谱检测与生信分析
实验结果
    一、GST pull-down实验与质谱分析
    二、PHF7相互作用蛋白的GO富集分析
    三、PHF7相互作用蛋白的KEGG分析
讨论



本文编号：3809386