LncRNA ZFAS1通过miR-10a/SKA1信号通路促进肾透明细胞癌增殖和转移

发布时间：2023-08-30 02:00

　　目的:肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是最常见泌尿生殖系统的恶性肿瘤之一,其中60⁸5%为肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)。近1/3的ccRCC患者在诊断时发生转移,预后不良。早期诊断和靶向治疗是目前提高ccRCC生存率的主要手段。锌指结构反义转录本1(NFX1-type zinc finger-containing protein 1 antisense RNA 1,ZFAS1)在人类多种恶性肿瘤组织中存在异常高表达,并与肿瘤患者不良预后密切相关,但其在ccRCC中的作用尚不明确。本研究旨在探讨ZFAS1在ccRCC中的作用,并通过研究ZFAS1与miR-10a和纺锤体和着丝粒相关蛋白1(spindle and kinetochore associated 1,SKA1)的关系,寻找ccRCC中存在的lncRNA-miRNA-mRNA的调控通路,揭示ccRCC的发生发展的分子机制,以期为ccRCC寻找新的分子治疗靶点。方法:本研究以人ccRCC组织60例、癌旁组织20例,人肾透...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要器材耗材、试剂和仪器
        2.1.1 主要器材耗材
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 组织标本收集及Real-time PCR检测相关基因表达
        2.2.2 细胞培养及相关实验
        2.2.3 质粒构建
        2.2.4 慢病毒颗粒的制备
        2.2.5 慢病毒感染及筛选
        2.2.6 瞬时转染
        2.2.7 CCK-8 检测细胞增殖-毒性检测
        2.2.8 Transwell检测细胞迁移及侵袭能力
        2.2.9 蛋白印迹(Western blot,WB)
        2.2.10 荧光素酶报告基因
        2.2.11 RNA结合蛋白免疫沉淀
        2.2.12 动物实验相关操作
        2.2.13 统计学处理
3 结果
    3.1 ZFAS1在cc RCC组织中高表达并与cc RCC患者临床病理特征及不良预后相关
    3.2 ZFAS1在cc RCC细胞系中的表达及ZFAS1 稳定地表达cc RCC细胞株的构建及确认
    3.3 ZFAS1 敲低抑制 ccRCC 细胞增殖、迁移和侵袭能力
    3.4 ZFAS1 对小鼠ccRCC瘤生长及转移的影响
    3.5 ZFAS1 靶向作用miR-10a
    3.6 cc RCC组织中miR-10a低表达并与ZFAS1 负相关
    3.7 ZFAS1 通过miR-10a调控ccRCC增殖、迁移和侵袭
    3.8 miR-10a靶向作用SKA1
    3.9 ccRCC组织中SKA1 高表达并与miR-10a表达负相关
    3.10 ZFAS1 通过miR-10a促进SKA1 表达
    3.11 SKA1 敲低抑制ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述 ZFAS1:一种新的肿瘤相关性长链非编码 RNA
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3844712