高糖刺激足细胞产生微囊泡及其机制的初步研究

发布时间：2023-10-06 18:27

　　目的： 观察高糖对体外培养的小鼠肾小球足细胞MV产生的影响,初步探讨其产生机制。 方法： 体外培养小鼠足细胞系MPC-5。 应用ELISA法检测足细胞MV产生,流式细胞仪检测足细胞凋亡,免疫荧光法检测足细胞ROS产生,Western blotting法检测足细胞p-ERK1/2/ERK1/2、 p-p38/p38和p-JNK/HNK蛋白的表达。 应用SPSS16.0统计软件进行数据处理分析。多组数据采用单因素方差分析(ANOVA), Tukey法检验,p<0.05为差异有统计学意义。应用Image-Pro Plus6.0软件分析荧光强度,测定ROS。应用Image J分析Western blotting图像的目标带光密度值。 结果： 1.随高糖孵育时间的延长,MVs产生随之增加,呈时间依赖性(图3)。24h时足细胞产生的MVs大约是Oh的4倍(p<0.01),48h时足细胞产生的MVs大约是0h的12倍(p<0.01)。 2.高糖对足细胞凋亡的影响：与NC组相比,MN组凋亡率差异无统计学意义(p>0.05),HG组可见明显细胞凋亡(p<0.01),凋亡率几...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1. 对象和方法
    1.1 对象
    1.2 主要仪器与设备
    1.3 药品及试剂
    1.4 主要实验试剂的配制
    1.5 肾小球足细胞复苏
    1.6 肾小球足细胞传代
    1.7 肾小球足细胞分化
    1.8 肾小球足细胞冻存
    1.9 细胞培养及分组
    1.10 Western-blotting法检测肾小球足细胞MAPK蛋白的表达
    1.11 肾小球足细胞内ROS检测
    1.12 肾小球足细胞凋亡检测
    1.13 肾小球足细胞MVs检测
    1.14 统计学分析
2. 结果
    2.1 肾小球足细胞增殖和分化状态的细胞形态
    2.2 高糖对足细胞产生MVs的影响
    2.3 高糖对足细胞凋亡的影响
    2.4 高糖对足细胞ROS产生的影响
    2.5 高糖对足细胞MAPK蛋白表达的影响
    2.6 ERK抑制剂对足细胞MVs产生的影响
3. 讨论
    3.1 足细胞与糖尿病肾病
    3.2 足细胞与微囊泡
    3.3 足细胞与氧化应激
    3.4 足细胞产生微囊泡的可能机制
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3852235