TLR4/p38 MAPK信号通路在小鼠间质性膀胱炎中的表达及意义

发布时间：2023-10-08 17:28

　　目的:通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠间质性膀胱炎(IC)模型,研究小鼠IC模型中Toll样受体4/p38丝裂原活化蛋白激酶(TLR4/p38 MAPK)信号通路的表达情况,为研究TLR4/p38 MAPK信号通路是否可作为IC治疗靶点提供实验依据。方法:C57BL/6J雌性小鼠60只,随机分为IC组(n=30)和对照组(n=30)。IC组小鼠分别于第1、3、5、7天腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg)建模,对照组小鼠分别于第1、3、5、7天腹腔注射等量生理盐水作为空白对照。于第8天时观察两组小鼠的刻板行为,统计刻板行为评分。于第9天时统计两组小鼠的排尿次数并分析两组小鼠之间排尿次数的差异。统计完成后将小鼠处死,取膀胱组织进行下列实验:1.通过苏木精-伊红染色(HE染色)观察小鼠IC模型病理学特征;2.通过甲苯胺蓝染色对比两组小鼠膀胱组织中肥大细胞浸润程度;3.通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测两组小鼠膀胱组织匀浆的上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;4.通过免疫印迹试验(Western blot)检测TLR4/p3...

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【学位级别】：硕士

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摘要
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引言
第一章 材料与方法
    1.实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
    2.实验方法
        2.1 小鼠IC模型的构建
        2.2 小鼠刻板行为评分
        2.3 小鼠排尿次数的统计
        2.4 石蜡切片的制备
        2.5 HE染色
        2.6 甲苯胺蓝染色
        2.7 ELISA检测膀胱组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达
        2.8 Western blot检测膀胱组织中TLR4/p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达
        2.9 qRT-PCR检测膀胱组织中TLR4、p38 MAPK、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达
    3.统计学处理
第二章 结果
    1.小鼠的行为改变
        1.1 小鼠刻板行为评分
        1.2 小鼠排尿次数
    2.小鼠膀胱组织病理学检查
        2.1 膀胱组织切片HE染色
        2.2 膀胱组织切片甲苯胺蓝染色及肥大细胞计数
    3.小鼠膀胱组织中TLR4/p38 MAPK信号通路相关因子表达水平的检测
        3.1 TLR4/p38 MAPK信号通路炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平
        3.2 TLR4/p38 MAPK信号通路相关分子的蛋白表达水平
        3.3 TLR4/p38 MAPK信号通路相关分子的m RNA表达水平
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录 (缩略词表)
致谢



本文编号：3852470