金钱草联合碳酸锂对草酸钙肾结石大鼠肠道菌群的影响

发布时间：2023-10-12 05:33

　　目的:本实验旨在利用高通量测序的方法探讨中药金钱草联合西药碳酸锂,对草酸钙结石大鼠肠道菌群的影响。方法:采用1%乙二醇溶液自由饮水及2%氯化铵2ml灌胃的方法建立实验性草酸钙肾结石大鼠模型,以金钱草及碳酸锂作为药物干预手段,以枸橼酸钾作为治疗药物对照组。SPF级雄性SD大鼠48只,随机分成8组(n=6):空白组(Z组)、成石组(M组)、金钱草治疗组(JQC组)、碳酸锂治疗组(L组)、柠檬酸钾治疗组(PC组)、金钱草联合低剂量碳酸锂治疗组(JLD组)、金钱草联合中剂量碳酸锂治疗组(JLZ组)、金钱草联合高剂量碳酸锂治疗组(JLG组)。各组大鼠在相同条件下干预56天后将大鼠进行标本收集。取各组大鼠粪便标本,提取标本中原核生物全基因组后采用16S rDNA V3/V4区基因测序方法分析菌群结构。左肾组织在显微镜下观察组织病理学改变和结晶沉淀的情况。探讨药物干预对草酸钙肾结石大鼠肠道菌群变化的影响。结果:(1)大鼠左肾石蜡切片结果:M组草酸钙结晶呈粗大广泛成堆结晶、连接成片状;JQC组、JLD组、JLZ组、PC组的晶体形成均少于M组;L组与JLG组组内表现不一致。(2)高通量测序分析结果:药物...

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中文摘要
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第一章 前言
    1.1 已知与草酸钙代谢相关的主要肠道菌群的分类
        1.1.1 乳杆菌属
        1.1.2 梭菌属
        1.1.3 瘤胃球菌属
        1.1.4 普雷沃菌属
        1.1.5 草酸杆菌属
        1.1.6 拟杆菌门
        1.1.7 软壁菌门
    1.2 正常肠道菌群在人体中的作用
        1.2.1 代谢功能
        1.2.2 营养作用
        1.2.3 防御作用
        1.2.4 抑瘤作用
        1.2.5 与胃肠道肿瘤的形成相关
    1.3 胃肠道菌群在抑制泌尿系结石形成及降低尿草酸水平所起的作用
    1.4 肠道菌群作为药品应用方面的现状及不足
    1.5 选择金钱草及碳酸锂做为干预药物的理由
第二章 材料与方法
    2.1 研究对象
    2.2 研究试剂及主要耗材
    2.3 主要试验仪器
    2.4 研究方法及内容
        2.4.1 建立大鼠草酸钙肾结石模型
        2.4.2 大鼠粪便标本采集
        2.4.3 大鼠取材及处理
        2.4.4 左肾取材及固定
        2.4.5 制备石蜡切片、H.E染色及读片
        2.4.6 大鼠血清、尿生化指标的检测
        2.4.7 大鼠粪便DNA提取/QC
        2.4.8 PCR扩增、文库扩建及上机测序
    2.5 数据处理
        2.5.1 测序数据处理
        2.5.2 OUT分析及物种注释
第三章 结果
    3.1 尿和血清生化指标
    3.2 大鼠病理石蜡切片结果
    3.3 各组OUT统计
    3.4 物种相对丰度图形展示
        3.4.1 门水平物种相对丰度图
        3.4.2 属水平物种相对丰度图
    3.5 样本复杂度分析
        3.5.1 α多样性指数
        3.5.2 α多样性指数组间差异分析
    3.6 多样本比较分析
        3.6.1 Unifrac分析
        3.6.2 PCA分析
    3.7 组间群落结构差异显著性分析
        3.7.1 Anosim组间差异性分析
        3.7.2 Metastats差异分析
第四章 讨论
结论
参考文献
附录 :文献综述 肠道菌群对草酸钙结石形成影响进展
    参考文献
在学期间成果
致谢



本文编号：3853546