miR-505-5p在膀胱癌中靶向调控PLK1抑制细胞增殖，迁移和诱导凋亡的机制研究

发布时间：2024-01-29 10:42

　　目的:膀胱癌发病率在全世界恶性肿瘤中高居第十位,在男性恶性肿瘤中排第六。在中国,膀胱癌是泌尿系统最高发的恶性肿瘤,也是男性最易发的恶性肿瘤之一,其发病率正逐年增加。膀胱癌的发生发展机制尚未研究清楚,且生物学行为复杂,极易复发和转移。因此研究膀胱癌发病机理及影响其进展的因素对癌症治疗有着至关重要的作用。而polo-like kinase 1(PLK1)与包括膀胱癌在内的多种癌症的发生发展有密切的关系。其致癌基因作用已被广泛证实。此外,微小RNA广泛存在于生物体的各种细胞中,参与生命体生长发育的各个阶段。它在物种间的高度保守性证明其有着重要作用。目前已有许多研究报道微小RNA与膀胱癌的发生发展相关。因此可以推测微小RNA可能与PLK1共同参与调节膀胱癌的生物学进程,研究微小RNA与PLK1影响膀胱癌的生物学特性的方式,可以为理解膀胱癌发生进展和临床治疗提供新的思路。方法:1、收集28对膀胱癌及癌旁正常组织,用qRT-PCR实验检测PLK1的mRNA表达量。2、用生物信息学的方法预测miR-505-5p可能调控PLK1,同时验证miR-505-5p在组织中的表达量,然后用皮尔森相关分析与PL...

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文略缩语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 研究对象和分组
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 细胞计数
        2.3.3 细胞瞬时转染
        2.3.4 双荧光素酶报告实验
        2.3.5 qRT-PCR实验检测RNA表达量
        2.3.6 Western blot检测蛋白表达量
        2.3.7 CCK-8 实验测细胞活性
        2.3.8 Transwell实验检测细胞迁移
        2.3.9 流式细胞术检测细胞凋亡
        2.3.10 统计学分析
3 实验结果
    3.1 miR-505-5p和 PLK1 在膀胱癌组织中的表达量及相关性
    3.2 miR-505-5p在膀胱癌细胞中抑制PLK1 的蛋白表达
    3.3 双荧光素酶报告基因系统证明miR-505-5p与 PLK1 mRNA的3'-UTR结合
    3.4 miR-505-5p通过靶向作用于PLK1 而影响膀胱癌细胞的生物学行为
        3.4.1 CCK-8 实验检测miR-505-5p对膀胱癌细胞增殖活力的影响
        3.4.2 Transwell实验检测miR-505-5p对膀胱癌细胞迁移能力的影响
        3.4.3 流式细胞术检测miR-505-5p对膀胱癌细胞凋亡的影响
    3.5 过表达PLK1 可以回复miR-505-5p对于膀胱癌细胞的生物学行为的影响
        3.5.1 过表达PLK1 可以提高膀胱癌细胞中PLK1 蛋白的表达量
        3.5.2 过表达PLK1 可以消除miR-505-5p对膀胱癌细胞的增殖影响
        3.5.3 过表达PLK1 可以消除miR-505-5p对膀胱癌细胞促凋亡作用
        3.5.4 过表达PLK1 可以消除miR-505-5p对膀胱癌细胞迁移的抑制能力
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3888030