枸杞花粉多糖对前列腺癌细胞PI3K/AKT信号通路的作用研究

发布时间：2024-03-09 01:58

　　目的前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一。现代研究表明,花粉在前列腺相关疾病的治疗中具有一定的作用。磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路与前列腺癌的发生和发展密切相关。本研究从枸杞花粉中分离提取并纯化得到较均一的多糖组分,并用细胞和动物实验观察其对人前列腺癌DU145细胞的凋亡及其对PI3K/AKT信号通路的影响;探讨枸杞花粉多糖的抗肿瘤活性及其可能的机制,为枸杞花粉多糖的生物学价值和前列腺癌的预防提供新的理论依据。方法通过水提醇沉法从枸杞花粉中提取粗多糖(Pollen Polysaccharides from Chinese Wolfberry,WPPs),经DEAE-纤维素柱和Sephadex G-100柱纯化后得到组分CF1。通过高效凝胶过滤色谱法鉴定CF1组分的均一性,并测定其分子质量;使用高效液相色谱法检测CF1组分的单糖组成。细胞实验采用不同浓度(0、125、250、500μg/mL)枸杞花粉多糖处理DU145细胞24 h,通过细胞增殖检测实验(MTT法)检测DU145细胞的增殖情况;采用原位末端标记法(Tunel)、流式细胞仪检测细胞凋亡;运...

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图1枸杞花粉多糖在DEAE纤维素-52色谱柱上的梯度洗脱曲线

图1枸杞花粉多糖在DEAE纤维素-52色谱柱上的梯度洗脱曲线花粉多糖的进一步纯化SephadexG-100凝胶色谱柱进一步纯化得到的1个组分为单一洗脱对，表明所得的多糖为较均一多糖。因此对该组分进行收集、透析、冷s纯品CF1。

图2SephadexG-100柱色谱法测定多糖CF1的洗脱曲线

图1枸杞花粉多糖在DEAE纤维素-52色谱柱上的梯度洗脱曲线花粉多糖的进一步纯化SephadexG-100凝胶色谱柱进一步纯化得到的1个组分为单一洗脱对，表明所得的多糖为较均一多糖。因此对该组分进行收集、透析、冷s纯品CF1。

图3枸杞花粉多糖组分CF1的HPLC图谱

大学硕士学位论文第一CF1组分的洗脱峰单一且比较对称，这说明CF1组分的纯度较高。多留时间为6.961min，通过线性回归方程计算，得到其分子质量为154图4所示，通过PMP衍生化分析CF1组分由甘露糖、葡萄糖醛酸、半、半乳糖、阿拉伯糖和盐藻糖组成，....

图4枸杞花粉多糖组分CF1的单糖组成

本文编号：3922725