miR-362-3p在肾细胞癌中的抑癌作用及其分子机制研究

发布时间：2024-04-25 03:55

　　背景:肾细胞癌是一种较为常见的泌尿系统恶性肿瘤,约占成人恶性肿瘤的3%和所有肾脏恶性肿瘤的90%。在中国,根据赫捷院士等人的统计,2015年新发肾癌病例66800例,死亡23400例。因肾细胞癌富血管的特点,其对于化疗和放疗缺乏敏感性,当前主要的治疗方式为手术治疗和靶向药物治疗。因对肾细胞癌发生发展的准确分子机制尚不完全清楚,探究其病理发生机制很有意义,能够指导临床诊断、药物治疗和术后监测。MicroRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA,长度一般约为20-24nt。其主要在转录后水平通过调控靶基因的信使RNA(messengerRNA mRNA),与其3’非翻译区(3’-Untranslated Region,3’-UTR)的特定序列结合来发挥作用。根据其与mRNA转录本的互补序列结合紧密程度,可以直接降解靶基因mRNA或抑制其翻译蛋白,从而阻止特定靶基因的表达。目前关于miRNA与肾细胞癌之间作用机制的研究文献很多,证实其通过不同的途径参与到肾细胞癌的发生、进展转移等各阶段。目的:从临床收集肾细胞癌组织标本,在实验室培养经典肾细胞癌细胞株进行研究,用荧光定量PCR法分别检测...

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
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英文摘要
缩略词表
引言
    参考文献
第一部分 MIR-362-3P在人肾细胞癌中的表达情况
    1.1 前言
    1.2 材料与方法
    1.3 结果
        1.3.1 组织样本的临床和病理特征
        1.3.2 肾细胞癌与癌旁组织MIR-362-3P的表达量比较
        1.3.3 肾细胞癌中MIR-362-3P表观遗传学修饰
        1.3.4 DNA甲基化酶抑制剂实验
    1.4 讨论
    1.5 结论
    1.6 参考文献
第二部分 MIR-362-3P对肾细胞癌细胞增殖、周期、侵袭和迁移的影响
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 结果
        2.3.1 MIR-362-3P在肾细胞癌细胞株786-O、ACHN和CAKI-1中的表达量显著降低
        2.3.2 外源性MIR-362-3P MIMIC可以有效上调肾癌细胞的MIR-362-3P表达量
        2.3.3 MIR-362-3P的表达上调可以显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力
        2.3.4 MIR-362-3P的表达上调可以显著抑制786-O和ACHN细胞的平板克隆形成能力
        2.3.5 MIR-362-3P的表达上调可以在体内水平显著抑制786-O皮下成瘤
        2.3.6 MIR-362-3P的表达上调可以引起786-O和ACHN细胞的G1期阻滞
        2.3.7 MIR-362-3P的表达上调可以显著抑制786-O和ACHN细胞的迁移和侵袭能力
        2.3.8 MIR-362-3P的表达上调可以显著抑制786-O和ACHN细胞的AKT/FOXO3A通路,从而抑制周期和逆转EMT
    2.4 讨论
    2.5 结论
    2.6 参考文献
第三部分 MIR-362-3P的靶基因及影响肾细胞癌的分子机制探讨
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 结果
        3.3.1 MIR-362-3P潜在靶基因的生物信息学预测和分析
        3.3.2 SP1是MIR-362-3P的直接作用靶点
        3.3.3 人肾细胞癌组织标本中癌基因SP1与预后相关性研究
        3.3.4 下调SP1的表达量与过表达MIR-362-3P的表型和信号通路一致
    3.4 讨论
    3.5 结论
    3.6 参考文献
小结与展望
综述
    参考文献
作者简历



本文编号：3963967