应激反应蛋白PAGE4对受氧化应激刺激的前列腺癌通过激活MAPK通路产生保护作用的机制研究

发布时间：2024-07-10 18:31

　　目的:前列腺癌(Prostate cancer,PCa)在全球男性新发恶性肿瘤中排名第二,而其死亡率排在第五位。虽然我国前列腺癌患病率在男性中排第六位,但却是少有的发病率持续上升的肿瘤。造成这种现象主要的原因是随着我国经济的发展,居民饮食结构发生了变化,平均寿命延长,体检越来越普及,这种传统观念上的“富贵病”发病率自然升高了。前列腺癌已逐渐成为泌尿外科的主要疾病。传统前列腺癌依据前列腺特异抗原(Prostate specific antigen,PSA)表达高低进行筛查,利用前列腺穿刺活检取组织,病理确诊并对前列腺癌进行分级。PSA的高低及病理评分与肿瘤的预后相关,但随着病人的异质性及药物的发展,这种预后指示效果已不如从前。PCa是一种激素依赖性肿瘤,大部分的肿瘤细胞依赖雄激素受体通路生存、增殖。因此目前针对PCa的治疗主要是阻断雄激素的合成,进而抑制雄激素受体的功能。虽然雄激素阻断治疗效果显著,但随着肿瘤的进展,许多患者的PSA会再次升高,进入致死性的去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)阶段。活性氧自由基(React...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 在氧化应激刺激下前列腺癌细胞中PAGE4升高及其功能的实验研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料与试剂#
            2.1.1 细胞系#
            2.1.2 抗体及试剂
        2.2 实验方法
            2.2.1 构建质粒及质粒抽提
            2.2.2 病毒包装及转染
            2.2.3 细胞处理
            2.2.4 RNA提取,反转录及Q-RT-PCR
            2.2.5 蛋白免疫印迹实验
            2.2.6 活性氧化物检测
            2.2.7 彗星实验
            2.2.8 Annexin V/ Propidium iodide双染检测
            2.2.9 数据统计分析
    3 结果
        3.1 外源性过氧化氢刺激可以引起前列腺癌细胞中PAGE4表达量的上升
        3.2 外源性过表达的PAGE4仍可以被ROS刺激引起表达量的升高
        3.3 PAGE4抑制细胞内ROS的产生,且受到特异性激酶的调控
        3.4 过表达的PAGE4可以减少前列腺癌细胞因ROS产生的DNA损伤
        3.5 过表达的PAGE4可以减少前列腺癌细胞因ROS产生的细胞凋亡
    4 讨论
    5 结论
第二部分 PAGE4通过调节MAPK信号通路影响前列腺癌预后的实验研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料与试剂
            2.1.1 细胞系
            2.1.2 抗体及试剂
        2.2 实验方法
            2.2.1 RNA建库,测序及分析
            2.2.2 蛋白免疫印迹实验
            2.2.3 免疫组化实验
            2.2.4 小鼠皮下移植瘤实验
            2.2.5 RNA提取,反转录及Q-RT-PCR
            2.2.6 病人样本生存曲线分析
            2.2.7 数据统计分析
    3 结果
        3.1 PAGE4对氧化应激压力的调控与MAPK通路相关
        3.2 PAGE4影响了MAPK通路
        3.3 PAGE4在体内促进肿瘤细胞的生长
        3.4 PAGE4在病人总的表达量高低影响了病人的预后
        3.5 PAGE4调节在氧化应激刺激下的前列腺癌细胞的MAPK通路
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：4004550