PAK2在去势抵抗性前列腺癌中表达升高的意义
发布时间：2017-06-03 02:03
本文关键词：PAK2在去势抵抗性前列腺癌中表达升高的意义，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的:检测不同人的前列腺组织中PAK2以及PAK2活化形式PAK2-S141P表达水平,探究雄激素在前列腺肿瘤细胞中对PAK2的影响以及PAK2在去势抵抗性前列腺癌中的作用。方法:1、利用免疫组织化学染色法分别检测人良性前列腺增生(BPH),雄激素依赖性前列腺癌(ADPC)和去势抵抗性前列腺癌组织(CRPC)中PAK2和PAK2-S141P的表达水平并比较三组间表达差异。2、细胞实验中,雄激素受体阳性前列腺癌LNCaP细胞在无类固醇培养液培养48h后,应用双氢睾酮(DHT)分别处理30min,2h,4h,8h,24h,48h,72h,蛋白印迹(western blot)检验细胞内PAK2表达水平,雄激素受体抑制剂恩杂鲁胺(MDV3100)处理LNCaP细胞24h后,同样检测PAK2的表达水平;利用小干扰RNA特异性沉默前列腺癌C4-2细胞的PAK2基因,通过细胞克隆形成实验和细胞侵袭实验检测PAK2对前列腺肿瘤细胞增殖和迁徙的影响。3、动物实验中,应用前列腺癌PC3细胞系皮下种植Balb/c裸鼠,建立裸鼠皮下异种移植成瘤模型,实验组以PAK2抑制剂PF-3758309灌胃处理,对照组给予等浓度,等体积的二甲基亚砜(DMSO),相同生长条件下观察两组肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,并用免疫组化方法检验肿瘤Ki67,Caspase-3和PAK2-S141P的表达水平。结果:1.PAK2和PAK2-S141P蛋白在前列腺癌组织中的表达高于良性前列腺增生组织;在前列腺癌组织中,去势抵抗期两种蛋白的表达又高于雄激素依赖时期的癌组织。2.经过双氢睾酮处理的前列腺癌LNCaP细胞相对于无类固醇培养液内培养的LNCaP细胞PAK2的表达水平较低,而经雄激素受体抑制剂恩杂鲁胺处理的LNCaP细胞内PAK2的表达升高。说明在雄激素缺乏的情况下,PAK2出现了过表达。沉默PAK2基因后,C4-2细胞的增殖活性和迁徙能力受到明显抑制,同对照组相比差异有统计学意义(P㩳0.05)。PAK2能促进前列腺癌C4-2细胞的增殖和迁徙。3.动物实验中,应用PAK2抑制剂PF-3758309处理后的裸鼠PC3细胞肿瘤生长明显受到抑制,实验组Ki67,PAK2-S141P表达降低,Caspase-3表达增高,差异有统计学意义(P0.05)。说明PAK2抑制剂抑制肿瘤细胞增殖,促进细胞凋亡。结论:PAK2在良性前列腺增生组织、激素依赖性前列腺癌组织和去势抵抗性前列腺癌中的表达逐渐增高,故其可能在前列腺癌的进展过程中起着重要作用。沉默PAK2基因可以抑制前列腺癌C4-2细胞的迁徙及增殖活性,PAK2抑制剂PF-3758309抑制小鼠异种移植前列腺癌PC3细胞成瘤的生长,因而PAK2可能会成为治疗前列腺癌尤其是去势抵抗性前列腺癌的一个靶点。
【关键词】：P21 蛋白活化激酶2 去势抵抗 前列腺癌 异种移植
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.25
【目录】：
- 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 缩略语/符号说明10-11
- 前言11-15
- 研究现状、成果11-14
- 研究目的、方法14-15
- 一、PAK2在人前列腺组织中表达水平的研究15-23
- 1.1 对象和方法15-18
- 1.1.1 研究对象15-16
- 1.1.2 实验材料16-17
- 1.1.3 实验方法17-18
- 1.2 结果18-20
- 1.2.1 人前列腺组织PAK2免疫组化表达水平18-20
- 1.2.2 人前列腺组织PAK2和PAK2-S141P免疫组化结果分析20
- 1.3 讨论20-21
- 1.4 小结21-23
- 二、雄激素素对前列腺癌细胞PAK2的影响及PAK2对细胞生长的影响23-36
- 2.1 对象和方法23-31
- 2.1.1 研究对象23
- 2.1.2 实验材料23-25
- 2.1.3 实验方法25-31
- 2.2 结果31-33
- 2.2.1 DHT处理LNCaP细胞后PAK2的表达变化31
- 2.2.2 MDV3100对LNCaP细胞PAK2表达的影响31
- 2.2.3 C4-2细胞克隆形成实验和侵袭实验结果31-33
- 2.3 讨论33-35
- 2.4 小结35-36
- 三、PAK2抑制剂对裸鼠异种移植肿瘤生长的影响36-43
- 3.1 对象和方法36-38
- 3.1.1 研究对象36
- 3.1.2 实验材料36-37
- 3.1.3 实验方法37-38
- 3.2 结果38-41
- 3.2.1 PAK2抑制剂PF-3758309对前列腺癌PC3细胞小鼠成瘤的影响38-39
- 3.2.2 PAK2抑制剂PF-3758309处理组与对照组Ki67,Caspase3,PAK2-S141P的表达水平39-41
- 3.3 讨论41-42
- 3.4 小结42-43
- 结论43-44
- 参考文献44-48
- 发表论文和参加科研情况说明48-49
- 综述 P21蛋白活化激酶2与去势抵抗性前列腺癌研究进展49-63
- 综述参考文献58-63
- 致谢63
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1 王超;PAK2在去势抵抗性前列腺癌中表达升高的意义[D];天津医科大学;2015年
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本文编号：416992
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