沉默Robo基因对人膀胱移形上皮癌细胞T24增殖的影响

发布时间：2017-07-18 06:21

  本文关键词：沉默Robo基因对人膀胱移形上皮癌细胞T24增殖的影响

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【摘要】：【目的】研究Robo蛋白在人膀胱移形上皮癌细胞(T24)中的表达及沉默Robo基因对T24细胞增殖的影响。【方法】实验分为两组,对照组(不转染载体)和转染组(转染复合载体),每组20例。对照组体外培养T24细胞,用免疫组织化学、免疫荧光和蛋白质印迹检测是否有Robo蛋白的表达及其表达亚型;转染组利用RNA干扰技术,寻找表达基因的沉默位点,构建合理的表达载体,转染T24细胞,免疫荧光化学观察细胞转染结果,蛋白质印迹来检测该表达基因沉默后蛋白表达的变化,MTT检测该表达基因沉默后细胞存活率变化。【结果】1免疫组化和免疫荧光检测显示T24细胞中有Robo1和Robo4表达,且表达差异无统计学意义(P=0.363和P=0.241),而正常膀胱移行上皮细胞中无表达,蛋白质印迹证实了免疫组化结果(P=0.205)。2沉默Robo基因后,T24细胞中Robo1和Robo4的表达受到抑制,尤其是Robo1的表达几乎受到全部抑制(免疫荧光P=0.002,蛋白印迹P=0.0001),MTT法检测显示Robo1干扰组细胞的存活率明显下降,与对照组及Robo4组相比差异有显著性(分别为P=0.012和P=0.023)。【结论】T24细胞中存在Robo1和Robo4两种蛋白受体,沉默Robo基因后,Robo1的表达和T24细胞的存活率明显下降。
【作者单位】： 广东药科大学基础学院;佛山市南海区第四人民医院泌尿外科;河南大学附属淮河医院泌尿外科;
【关键词】： 人膀胱形上癌T细胞 Robo蛋白 免疫荧光 免疫组化 蛋白质印迹 RNA干扰
【基金】：广东省“4百十”工程人才培养项目(2050205F-43-03)
【分类号】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿外科常见的恶性肿瘤,病因不明。膀胱癌在我国泌尿系统肿瘤中发病率和死亡率均居首位,随着社会老龄化程度加剧,其发病率、死亡率呈逐年上升趋势[1]。Slits是一种分泌型细胞外基质蛋白,在哺乳动物体内存在Slitl、Slit2、Slit3三种亚型,即Slit1、Slit2和Slit3,三者均

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本文编号：556418