Chk1基因表达对精子密度和活力影响的相关研究

发布时间：2017-08-07 15:45

  本文关键词：Chk1基因表达对精子密度和活力影响的相关研究

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【摘要】：目的:通过检测不同密度和活力的精子的DFI(DNA fragmentation rate,DNA碎片率)、精子细胞存活率及Chk1基因的相关表达,研究精子细胞的密度及活力与Chk1基因表达的关系,并进一步探讨Chk1基因与男性不育之间的相关性。方法:将收集的人类男性精液标本行精液常规检查,根据密度和活力分别分为正常对照组、少精组、弱精组和少弱精组,每组标本各20份。采用吖啶橙法(AOT)检测4组精子中DNA的碎片率,采用伊红—Y染色法检测4组精子存活率,采用RT-PCR方法检测各组精子中Chk1 m RNA的表达,并计算其相对表达量,采用western-blot方法检测各组精子中Chk1蛋白的表达,并计算其相对表达量。结果:1)吖啶橙法检测DNA碎片率发现,与正常组相比,少精子组、弱精子组、少弱精子组DNA碎片率无明显差异(P0.05);伊红—Y染色法检测精子存活率发现,与正常组相比,少精子组、弱精子组、少弱精子组的精子存活率明显降低,各组间比较均有显著性差异(P0.05);2)将各组依照DFI%值分为DFI30%和DFI≤30%两组后,两组精子活力、精子密度和精子存活率之间的差异均有统计学意义(P0.05);3)RT-PCR检测表明Chk1基因在正常对照组和其他3组的精子中均有表达,四组Chk1基因的相对表达量的组间差异具有显著性(P0.01)。其相对表达量同精子密度和活力进行Pearson相关分析结果表明,Chk1基因的相对表达量与精子的密度和活力存在相关性(P0.05)。4)Western-Blot检测表明Chk1蛋白在正常对照组和其他3组的精子中均有表达,四组Chk1蛋白的相对表达量的组间差异具有显著性(P0.01)。结论:1)DFI与精子密度、活力无显著相关性,但DFI异常可能为影响精子密度和活力的重要因素;2)精子存活率与精子的密度、活力密切相关;3)Chk1在人类精子中有显著表达,且在正常男性与少精、弱精及少弱精患者中的表达显著不同,其表达的改变可能影响精子细胞的密度和活力。
【关键词】：精子 Chk1 DNA损伤 不育
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-19
• 1.1 研究对象12
• 1.2 实验试剂和仪器12-15
• 1.3 实验主要测定指标与方法15-18
• 1.4 统计分析18-19
• 2 结果19-23
• 2.1 正常组、少精组、弱精组、少弱精组DFI及精子存活率结果比较19-20
• 2.2 精子DFI与精子浓度、前向运动精子(PR)、精子存活率（%）的相关性分析20
• 2.3 精子细胞Chk1 mRNA在各组之间的表达20-22
• 2.4 精子细胞Chk1 基因蛋白在各组之间的表达22-23
• 3 讨论23-25
• 4 结论25-26
• 参考文献26-28
• 综述28-40
• 参考文献35-40
• 致谢40-41
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果41-42
• 个人简历42

【引证文献】

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 陈建伟;崔云;张晓霞;;精子DNA完整性分析技术及其男性不育中医证治应用[A];中华中医药学会第十一届男科学术大会论文集[C];2011年

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本文编号：635434