TSLC1过表达对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究

发布时间：2017-08-08 23:06

  本文关键词：TSLC1过表达对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究

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【摘要】：目的:研究过表达肺癌肿瘤抑制因子-1(TSLC1)对人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生长的抑制作用及相关分子机制。方法:将构建好的TSLC1过表达人膀胱癌T24细胞株(Ad-TSLC1-T24)、空载体对照T24细胞株(Ad-T24)及空白对照T24细胞株种植于裸鼠皮下,观察裸鼠移植瘤生长情况,每5天测量计算移植瘤体积一次,并绘制肿瘤的生长曲线,观察TSLC1过表达对人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生长的影响。种植肿瘤细胞5周后处死全部裸鼠并留取肿瘤组织标本,称量瘤重并计算抑瘤率。在光镜下观察移植瘤的病理变化,并使用免疫组化检测人膀胱癌移植瘤中TSLC1蛋白的表达情况,并利用Western blot和RT-PCR技术检测裸鼠移植瘤中TSLC1蛋白及m RNA表达。利用RT-PCR技术检测移植瘤中Bcl-2、Bax、Caspase-3 m RNA的相对表达量。利用Western Blot技术检测移植瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白相对表达量,探讨TSLC1抑制肿瘤生长的相关的分子机制。结果:成功构建三组肿瘤移植瘤模型,肿瘤生长曲线显示Ad-TSLC1-T24组移植瘤生长明显慢于Ad-T24组及T24组(P0.05),5周后实验结束时,Ad-TSLC1-T24组裸鼠移植瘤体积较Ad-T24组及T24组相比明显小(P0.05),Ad-TSLC1-T24组肿瘤重量明显低于Ad-T24组及T24组(P0.05),三组重量分别是(1.1±0.4)g、(1.8±0.5)g、(2.1±0.9)g,抑瘤率为47.6%,明显高于Ad-T24组(14%,P0.05)。HE染色结果显示,TSLC1过表达组移植瘤细胞具有明显的肿瘤细胞凋亡坏死现象。免疫组化结果显示,TSLC1在Ad-TSLC1-T24组移植瘤中表达呈强阳性,在Ad-T24组及T24组中表达均呈弱阳性。Western blot结果显示TSLC1蛋白在Ad-TSLC1-T24组的相对表达量高于Ad-T24组及T24组,RT-PCR结果显示TSLC1m RNA在Ad-TSLC1-T24组的相对表达量高于Ad-T24组及T24组,Ad-T24组及T24组两组之间TSLC1蛋白及m RNA的表达均没有明显差别。RT-PCR结果显示Ad-TSLC1-T24组较Ad-T24组与T24组移植瘤中Bax、Caspase-3 m RNA相对表达量增加(P0.05),Bcl-2 m RNA相对表达量降低(P0.05),Ad-T24组与T24组差异无统计学意义(P0.05)。Western Blot结果显示Ad-TSLC1-T24组较Ad-T24组与T24组移植瘤中Bax、Caspase-3蛋白相对表达量增加(P0.05),Bcl-2蛋白相对表达量降低(P0.05),Ad-T24组与T24组差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.TSLC1基因过表达对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用。2.TSLC1抑制膀胱癌裸鼠移植瘤的机制可能与提高Bax/Bcl-2比例及上调促凋亡蛋白Caspase-3的表达,促进膀胱癌肿瘤细胞的凋亡有关。
【关键词】：肺癌肿瘤抑制因子1 膀胱癌 裸鼠 移植瘤 细胞凋亡
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 缩略语/符号说明9-11
• 前言11-15
• 研究现状、成果11-14
• 研究目的、方法14-15
• 对象和方法15-30
• 结果30-38
• 讨论38-46
• 结论46-47
• 参考文献47-52
• 发表论文和参加科研情况说明52-53
• 综述 肺癌肿瘤抑制因子1的研究进展53-68
• 综述参考文献63-68
• 致谢68-70
• 个人简历70

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本文编号：642409