靶向survivin基因的shRNA慢病毒载体的构建及其对膀胱癌EJ细胞凋亡的影响

发布时间：2017-08-16 11:35

  本文关键词：靶向survivin基因的shRNA慢病毒载体的构建及其对膀胱癌EJ细胞凋亡的影响

  更多相关文章： 载体构建 survivin 短发卡状RNA(shRNA) 膀胱癌 细胞凋亡

【摘要】：目的:构建survivin基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,转染膀胱癌EJ细胞,研究survivin基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制情况,观察survivin shRNA慢病毒载体对EJ细胞凋亡的影响.方法:以survivin基因为靶标设计shRNA干扰序列,克隆至p SIH1-H1-cop GFP慢病毒载体.干扰载体鉴定正确后转染膀胱癌细胞株EJ细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况,实时荧光定量PCR检测survivin基因mRNA含量变化,Western blotting法检测survivin蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测EJ细胞凋亡情况.结果:PCR扩增鉴定、DNA测序证实survivin慢病毒干扰载体构建成功;EJ细胞经干扰载体处理后,EJ细胞survivin基因mRNA水平下调了73.33%,蛋白表达受到显著抑制,EJ细胞凋亡率达到24.39%.结论:成功构建了靶向survivin基因的shRNA重组慢病毒干扰载体,可以显著降低转染细胞survivin基因的表达水平,并有效提高膀胱癌细胞凋亡率.
【作者单位】： 兰州大学第二医院泌尿外科研究所甘肃省泌尿系统疾病研究重点实验室甘肃省泌尿系临床医学中心;
【关键词】： 载体构建 survivin 短发卡状RNA(shRNA) 膀胱癌 细胞凋亡
【基金】：甘肃省科技计划项目(1308RJYA056) 甘肃省泌尿系疾病临床医学中心开放课题基金项目(mnlczxkf-28) 兰州大学中央高校基本科研业务费项目(lzujbky-2014-165)
【分类号】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,占中国泌尿系肿瘤发病率首位,2012年全国肿瘤登记地区膀胱癌的发病率为6.61/10万,列恶性肿瘤发病率的第9位,而在西方国家的泌尿系肿瘤中发病率居第2位,仅次于前列腺癌.因此探讨相关癌基因与膀胱癌的发生、发展的相关性对提高膀胱癌疗效具有

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 聂祝青;田小林;朱小宝;;Survivin和Caspase-3在结直肠癌中表达及临床意义[J];结直肠肛门外科;2013年04期

2 黄亚男;宋灿;魏玉娜;霍海如;朱亚英;谭余庆;;生存素与三氧化二砷功能的相关性及其对肿瘤细胞凋亡的影响[J];国际药学研究杂志;2013年05期

3 沈建军;李斌;龙敏;姜南艳;林芳;何婷;张惠中;;肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体的构建及其在前列腺癌细胞中的RNA干涉作用[J];现代肿瘤医学;2013年09期

4 华子辰;朱正伦;朱正纲;;血清肿瘤标志物在胃癌诊疗中的应用[J];上海交通大学学报(医学版);2014年09期

5 陈瑜;王振国;李争;;宫颈及其他鳞癌SCC-Ag、Survivin研究现状[J];现代肿瘤医学;2015年07期

6 任斐;任鸿;;cyclin D1和survivin在大肠癌组织中的表达[J];世界中西医结合杂志;2015年03期

7 井昶雯;曹海霞;马蓉;王卓;吴建中;;非小细胞肺癌Survivin和Skp2的表达及其临床意义[J];中国肿瘤外科杂志;2013年04期

8 朱正明;欧阳喜;罗洪亮;黄俊;朱培谦;;Survivin基因启动子区多态性与结肠癌易感性及临床意义的相关性[J];世界华人消化杂志;2014年09期

9 Jinlong Liu;Xuejun Zhang;Shuguang Yang;Zhao Zhang;Qiuju Yue;Xiaodong Liu;;Meta分析:生存素表达评估胰腺癌预后的价值(英文)[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2014年06期

10 冷秀梅;刘皓;冯小可;魏睦新;;基于Survivin、Livin凋亡抑制蛋白探讨化痰消瘀方逆转胃癌癌前病变的作用机制[J];世界华人消化杂志;2014年33期

中国博士学位论文全文数据库 前9条

1 李群;Survivin的下调对内质网应激诱导的黑色素瘤细胞凋亡抗性的影响机制研究[D];安徽医科大学;2012年

2 苏凯;TC-1（c8orf4）在非小细胞肺癌增殖、迁移和侵袭中作用的研究[D];第四军医大学;2013年

3 沈晗;基于点突变Survivin表位肽的TCR基因筛选及抗肝癌作用研究[D];南方医科大学;2013年

4 曾瀚庆;肝再生增强因子对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其机制研究[D];重庆医科大学;2013年

5 张金山;低剂量~(125)I内照射A549肺癌的有关分子生物学及~(99)Tc~m-AnnexinV与MR-DWI影像学研究[D];暨南大学;2013年

6 戴洋;Heterologous prime-boost免疫策略增强日本血吸虫病疫苗免疫保护作用的研究[D];南京医科大学;2014年

7 王若蛟;翼状胬肉中Survivin、VEGF、Cox-2表达及其相关性研究[D];北京协和医学院;2014年

8 叶佑范;Survivin及其抑制剂YM155对角膜新生血管作用的研究[D];华中科技大学;2014年

9 华子辰;血清CA125在胃癌腹膜转移中的临床价值[D];上海交通大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王佳;褐藻多糖硫酸酯对人肺腺癌A549细胞增殖、迁移与凋亡的影响[D];大连医科大学;2012年

2 胡华平;Survivin和Ki-67在肾细胞癌中的表达及其临床意义[D];福建医科大学;2013年

3 金丽;奇异变形杆菌鞭毛蛋白质FliD和人染色体移动复合物的初步晶体学研究[D];重庆医科大学;2013年

4 陈伟;散血草对裸鼠模型血管瘤生长及Fas/FasL表达影响的研究[D];泸州医学院;2013年

5 田甜;肝复康对肝纤维化大鼠肝组织及肝星状细胞凋亡相关蛋白的影响[D];大连医科大学;2013年

6 孙良文;慢病毒介导的shRNA干扰IRG1基因表达及其在布鲁菌感染中的作用[D];吉林大学;2014年

7 王丽鑫;DADS诱导人胃癌BGC823细胞凋亡及其与smac和survivin表达的关系[D];山西医科大学;2014年

8 李慧萍;细胞周期依赖的ApoB RNA编辑的研究[D];浙江师范大学;2014年

9 管小倩;氟尿嘧啶植入剂对结直肠癌患者外周血survivin、caspase-3、CD44V6的影响[D];桂林医学院;2014年

10 王陈萍;新型核苷类似物FNC对非霍奇金淋巴瘤细胞侵袭力影响的实验研究[D];郑州大学;2014年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄后宝;董昌斌;路建磊;姜书传;;表浅性膀胱癌预后与癌肿数目、病理分级的关系[J];现代肿瘤医学;2006年04期

2 李朝争;李妤蓉;赵金媛;;表浅性膀胱癌的治疗[J];社区医学杂志;2007年01期

3 于春华;李金庆;高岱清;;膀胱癌化学药物敏感性试验[J];河北医学;2007年02期

4 郝楠馨;诸静其;曹开明;常时新;汪波;刘颖;;膀胱癌的多层螺旋CT征象与病理表现的关系[J];中国医学影像学杂志;2009年02期

5 夏昕晖;何莉;戴福宏;钟甘平;;调控组蛋白乙酰化水平抑制膀胱癌细胞周期的研究[J];现代肿瘤医学;2009年04期

6 陈建超;;中西医结合治疗预防膀胱癌术后复发观察[J];中国医药指南;2010年18期

7 赵德祥;;螺旋CT在膀胱癌诊断中的应用[J];医学信息(上旬刊);2010年08期

8 张辉;尚超;宋永胜;;肝癌衍生生长因子与膀胱癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力影响[J];解剖科学进展;2010年05期

9 木海琦;杨森;王怡君;陈映鹤;;百里醌抑制膀胱癌细胞生长的实验研究[J];医学研究杂志;2011年11期

10 李涛;杨立;王志平;;鼠膀胱癌原位模型建立的研究进展[J];现代泌尿生殖肿瘤杂志;2013年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张永春;谷江;孙发;石家齐;;传统医学在膀胱癌治疗中的意义[A];2010年贵州省泌尿外科学术会议论文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小莹;王e，

本文编号：683078