膀胱癌T24耐药株的构建及其生物学特性分析

发布时间：2017-08-21 07:28

  本文关键词：膀胱癌T24耐药株的构建及其生物学特性分析

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【摘要】：背景：膀胱癌是泌尿生殖系统常见肿瘤之一，在西方发达国家中其发病率占男性恶性肿瘤的第4位，女性第9位。在我国居泌尿生殖系统恶性肿瘤发病第1位，，并且有逐年增长的趋势。手术切除结合膀胱灌注治疗是临床上治疗浅表性膀胱癌的主要手段，但仍有40%－80%的复发率。化疗耐药是复发的主要原因之一，对于化疗耐药的机制目前并不明确。因此，我们通过构建了膀胱移行细胞癌T24的耐药株，并对其生物学特性进行分析，从而研究其形成机制。 实验设计:采用丝裂霉素C（MMC）浓度梯度持续递增法诱导建立膀胱癌T24耐药株；使用高倍显微镜观察细胞的形态；采用MTT法检测耐药株与亲本细胞的增殖活性及生长能力；采用平板克隆形成试验检测耐药株与亲本T24细胞的单细胞集落形成能力；采用Transwell迁移、侵袭实验检测耐药株与亲本T24细胞的迁移和侵袭能力；采用无血清悬浮培养法检测耐药株与亲本T24细胞的成球能力及肿瘤干细胞的富集情况。 结果:1.使用初始浓度为10μg/mL丝裂霉素持续增量诱导，历时4个月，直到细胞能在0.2mg/mL的RPMI1640培养基中稳定、良好生长，并能持续传代，形成膀胱癌T24耐药细胞株。 2.在MTT试验中，撤药后T24/MMC的生长更加迅猛，生长能力较亲代细胞增强。通过平板克隆试验、Transwell迁移、侵袭实验中发现T24/MMC细胞与亲代细胞相比，克隆形成能力、迁移和侵袭能力均增加，说明耐药株T24/MMC恶性程度更高。 3.在无血清成球培养试验中，T24/MMC细胞在第三天就开始明显成球，与亲代细胞相比，成球时间更短，成球率更高，球囊更紧密，体积也更大，说明T24/MMC细胞中富集了癌干细胞。 结论:低浓度丝裂霉素持续增量法可诱导形成膀胱癌T24耐药细胞株，且耐药株T24/MMC恶性程度更高，癌干细胞被富集。
【关键词】：膀胱癌 T24 耐药株 癌干细胞
【学位授予单位】：湖北科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料与方法10-16
• 结果16-20
• 讨论20-27
• 参考文献27-33
• 文献综述33-42
• 参考文献39-42
• 攻读学位期间取得的学术成果42-43
• 致谢43

【参考文献】

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本文编号：711604