α1-肾上腺素在前列腺Cajal间质细胞上的表达及意义

发布时间：2017-08-26 03:38

  本文关键词：α1-肾上腺素在前列腺Cajal间质细胞上的表达及意义

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【摘要】：目的:通过体外分离豚鼠前列腺、切片、体外分离培养前列腺Cajal间质细胞(ICCs)及双标免疫荧光从组织学及细胞学角度观察α1肾上腺素受体在前列腺上的表达,探究α1-肾上腺素受体在豚鼠前列腺ICCs上的表达及其生理意义,为深入研究前列腺增生症、慢性前列腺炎及早泄等与前列腺平滑肌功能紊乱的相关疾病奠定基础。方法:本课题以成年豚鼠前列腺ICC为研究对象。制作豚鼠前列腺组织冰冻切片及体外培养的豚鼠前列腺细胞进行双重免疫荧光染色,使用酪氨酸激酶受体(c-Kit)作为ICCs的标记物,α肌动蛋白(α-actin)标记平滑肌细胞,分别进行c-Kit与α1-肾上腺素受体、α-actin与α1-肾上腺素受体配对的免疫荧光双标记染色。结果:豚鼠前列腺组织经切片、双标免疫荧光染色后,c-Kit染色阳性的ICCs分布于平滑肌之间,c-Kit与α1-肾上腺素受体抗体在ICCs上均染色阳性,平滑肌上α1-肾上腺素受体染色阳性。且ICCs上α1-肾上腺素受体染色明显较平滑肌上α1-肾上腺素受体染色深。体外分离培养的前列腺ICCs呈梭形或星形,分布于平滑肌中,细胞相对于平滑肌细胞较小,ICCs借细胞两侧突起与周边ICC或SMC连接在一起呈网状分布。体外分离培养的豚鼠前列腺ICCs,染色后置于激光共聚焦显微镜下观察,ICCs上同时存在c-Kit受体与α1-肾上腺素受体。此外,体外分离培养的前列腺ICCs占混合细胞培养的少数,绝大多数细胞为前列腺平滑肌细胞,其细胞相对于ICCs较大,其形态多样,倒置显微镜下很容易与ICCs细胞鉴别,细胞多聚集在一起呈团块状。结论:(1)前列腺ICCs上确实存在α1-肾上腺素受体。(2)α1-肾上腺素受体在前列腺ICCs上的表达明显高于在前列腺平滑肌上的表达。(3)前列腺ICCs与前列腺平滑肌形成“神经信号-ICCs-平滑肌”这一信号传递系统可能参与射精的调节过程,具体机制有待进一步研究。(4)体外成功分离培养出3种不同形态的前列腺ICCs,可能为前列腺ICCs的3种不同亚型,具体情况尚有待研究。
【关键词】：Cajal间质细胞 α1-肾上腺素受体 交感神经 前列腺 豚鼠
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R697.3
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文缩略词表8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-15
• 1. 一般材料11
• 1.1 实验动物要求及来源11
• 1.2 实验所需试剂及来源11
• 1.3 实验仪器11
• 2. 方法11-15
• 2.1 豚鼠前列腺标本取材11-12
• 2.2 组织免疫荧光标记鉴定ICCs12
• 2.3 组织免疫荧光双重标记12
• 2.4 豚鼠前列腺ICCs体外培养12-13
• 2.5 细胞免疫荧标记鉴定体外分离培养ICCs13
• 2.6 细胞免疫荧光双重标记前列腺ICCs13-14
• 2.7 细胞免疫荧光双重标记前列腺平滑肌14-15
• 结果15-18
• 1. 组织水平结果15-16
• 1.1 组织免疫荧光标记鉴定ICCs15
• 1.2 组织免疫荧光双重标记15-16
• 2. 体外分离培养的前列腺ICCs16
• 3. 细胞学免疫荧光16-18
• 3.1 体外分离培养ICCs免疫荧光鉴定16-17
• 3.2 体外分离培养ICCs免疫荧光双重标记17
• 3.3 体外分离培养豚鼠前列腺平滑肌免疫荧光双标染色17-18
• 讨论18-22
• 结论22-23
• 参考文献23-26
• 文献综述26-32
• 参考文献29-32
• 致谢32-33
• 附录33-36
• 作者简介36-37
• 导师评阅表37

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本文编号：739426