肾细胞癌RASSF2A基因启动子甲基化状态及转录表达的研究

发布时间：2017-09-06 21:24

  本文关键词：肾细胞癌RASSF2A基因启动子甲基化状态及转录表达的研究

  更多相关文章： 肾细胞癌 RASSF2A 启动子 甲基化 基因表达

【摘要】：目的:肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁我国人群的健康。随着对肿瘤病因研究的不断深入,发现表观遗传学改变在肿瘤的发生、发展过程中起着非常重要的作用。表观遗传学研究主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、RNA干扰、遗传印记及随机染色体(X)失活,目前研究比较深入的就是抑癌基因DNA甲基化与肿瘤之间关系。有文献已经证实RASSF2A基因启动子甲基化是导致鼻咽癌、乳腺癌等恶性肿瘤发生、发展的原因之一。而RASSF2A的甲基化是否与RCC有关则未见报道。本研究通过检测RCC组织、癌旁及正常组织中RASSF2A基因启动子的甲基化状态及其m RNA的表达情况,初步探讨RASSF2A基因在RCC发生发展中的作用,为RCC的早期诊断和治疗提供理论依据。方法:本研究拟采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)来检测60例RCC组织、癌旁及正常组织中RASSF2A基因的启动子甲基化状态;采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)来检测60例RCC组织、癌旁及正常组织中RASSF2A基因m RNA的相对表达量。并运用统计软件SPSS20.0对数据进行统计学处理,分析RASSF2A基因与临床参数之间的关系。结果:1在RCC组织、癌旁及正常组织中RASSF2A基因有三种不同的甲基化状态:完全非甲基化、不完全甲基化、完全甲基化。2 60例RCC组织、癌旁及正常组织标本中其甲基化率分别为36.7%(22/60),13.3%(8/60),11.7%(7/60),经统计学分析,RCC组织RASSF2A基因启动子甲基化率明显高于癌旁及正常组织,其差异具有统计学意义(χ2=8.711 P=0.003,χ2=10.231 P=0.001);RASSF2A基因启动子甲基化率在癌旁组织和正常组织中差异无统计学意义(χ2=0.076 P=0.783)。60例RCC组织标本中,RASSF2A基因启动子甲基化率在性别(χ2=0.191 P=0.662)、年龄(χ2=0.463 P=0.496)、肿瘤大小(χ2=0.301 P=0.583)、Fuhrman核分级(χ2=0.935 P=0.621)四方面无统计学差异(P值均大于0.05);在吸烟(χ2=6.962 P=0.008)、临床分期(Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期)(P=0.003)两方面有统计学差异(P值均小于0.05)。3 60例RCC组织、癌旁及正常组织标本中RASSF2A基因m RNA的相对表达量分别为0.35±0.07、0.55±0.09、0.59±0.09,采用单因素方差分析进行统计学分析,RASSF2A基因m RNA的相对表达量在RCC组织中明显低于癌旁及正常组织,其差异具有统计学意义(P=0.000,P=0.000);癌旁组织和正常组织中RASSF2A基因m RNA的相对表达量差异无统计学意义(P=0.247)。60例RCC组织标本中,RASSF2A基因m RNA的相对表达量在性别(t=0.624,P=0.538)、年龄(t=-0.392,P=0.698)、肿瘤大小(t=-0.328,P=0.745)三方面无统计学差异(P值均大于0.05);在吸烟(t=-3.186,P=0.002)、临床分期(Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期)(t=-3.592,P=0.001)两方面有统计学差异(P值小于0.05)。4在RCC组织中,甲基化阳性患者RASSF2A基因m RNA的相对表达量为0.37±0.07,甲基化阴性患者RASSF2A基因m RNA的相对表达量0.57±0.11,经统计学分析其差异有统计学意义(t=-5.605,P=0.000)。结论:1 RASSF2A启动子区高甲基化是RCC的频发事件,抑癌基因RASSF2A的失活可能是导致RCC的重要原因之一。2 RASSF2A基因m RNA在RCC组织中的相对表达量明显低于癌旁组织和正常组织,提示RASSF2A基因m RNA表达下降可能参与了RCC的发生、发展过程。3在RCC组织中RASSF2A基因m RNA在甲基化阳性病例中的相对表达量低于甲基化阴性病例中m RNA的相对表达量。研究结果提示RASSF2A基因启动子区的高甲基化可能是导致其转录沉默的重要原因。
【关键词】：肾细胞癌 RASSF2A 启动子 甲基化 基因表达
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.11
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-20
• 结果20-22
• 附图22-24
• 附表24-27
• 讨论27-31
• 结论31-32
• 参考文献32-35
• 综述 表观遗传学在肿瘤中的研究进展35-45
• 参考文献41-45
• 致谢45-46
• 个人简历46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王瑞娴;徐建红;;基因组DNA甲基化及组蛋白甲基化[J];遗传;2014年03期

2 王慧涵;张国君;姚鲲;杨威;廖爱军;赵成海;刘卓刚;;SFRP5在白血病细胞中基因甲基化状态及蛋白表达分析[J];中国医科大学学报;2012年12期

，

本文编号：805527