应用甲基化基因检测技术分析前列腺癌中HIC1的甲基化状态
发布时间：2017-09-25 07:16
本文关键词：应用甲基化基因检测技术分析前列腺癌中HIC1的甲基化状态
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【摘要】：背景与目的:癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)因表观遗传甲基化修饰导致其在多种癌细胞和组织中表达沉默,可能与肿瘤的发生、发展有关。而这一现象在前列腺癌研究中的报道甚少。该研究采用甲基化基因检测技术对前列腺癌中HIC1启动子进行甲基化状态分析。方法:采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)和亚硫酸盐测序PCR(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术,对前列腺癌细胞PC3、C4-2B和正常前列腺上皮细胞Pr EC,以及前列腺癌组织标本和正常前列腺穿刺标本,进行HIC1启动子甲基化分析;并使用去DNA甲基化酶5-Aza-Cd R处理PC3、C4-2B和Pr EC,经反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析HIC1在基因水平和蛋白质水平上的变化。结果:MSP分析结果发现,在PC3、C4-2B和Pr EC中HIC1甲基化率分别为78.23%、72.15%和10.63%,差异有统计学意义(P0.05)。对36例人前列腺癌实体瘤和36例人前列腺正常穿刺组织进行BSP测序,统计显示,甲基化率分别是80.30%和31.56%。5-Aza-Cd R处理后的PC3、C4-2B和Pr EC经RT-PCR和Western blot分析发现,与未处理对照相比,HIC1转录水平和蛋白水平表达均显著上调。结论:在前列腺癌中,抑癌基因HIC1启动子呈高度甲基化状态并出现表达沉默或下调,可作为前列腺癌的早期预测指标和潜在的治疗靶点。
【作者单位】： 复旦大学附属公共卫生临床中心医学检验科;上海交通大学附属第六人民医院南院泌尿外科;
【关键词】： 甲基化特异性PCR 亚硫酸盐测序PCR 前列腺癌 癌高甲基化基因 甲基化
【基金】：上海市自然科学基金面上项目(13ZR1435000) 上海市科委2014年“科技创新行动计划”实验动物研究领域科技支撑重点项目(14140901400) 国家自然科学基金面上项目(81372318) 上海市教委科研创新项目(13YZ049) 上海市卫生局科研课题项目(20124309)
【分类号】：R737.25;R730.43
【正文快照】： 近年来,我国前列腺癌的发病率逐年上升,已跃居男性泌尿生殖系肿瘤的第3位[1],但前列腺癌侵袭转移的作用机制尚不清楚[2-3]。癌高甲基化基因1(hypermethylatedin cancer 1,HIC1)是一种抑癌基因[4]。目前研究表明,在多数肿瘤中,HIC1经常高甲基化,提高了甲基化转移酶的活性,以至
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1 郑江花;王景龙;郝e，
本文编号：916066
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