PAX2稳转细胞系构建及对细胞迁移和侵袭能力的作用研究

发布时间：2017-10-01 18:42

  本文关键词：PAX2稳转细胞系构建及对细胞迁移和侵袭能力的作用研究

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【摘要】：目的探讨PAX2稳转细胞系构建及生物学作用。方法选择处于对数生长期大鼠肾小管上皮细胞,实验分为稳转组、空载组、对照组。稳转组采用阳离子脂质体转导将p EGFP-PAX2转入大鼠肾小管上皮细胞,空载组采用同样方法配置空载质粒转染溶液,对照组不添加质粒转染溶液。经G418筛选,建立稳定转染细胞系。通过细胞划痕实验及Transwell实验检测PAX2稳转细胞系的细胞迁移率及细胞侵袭作用。结果应用G418筛选14 d,稳转组大鼠肾小管上皮细胞有明显克隆长出,建立PAX2基因稳定转染肾小管上皮细胞系。稳转组在荧光显微镜下可见绿色荧光,基因融合表达获得成功。稳转组细胞PAX2条带密度与β-action吸光度比值为(1.00±0.04),空载组为(0.83±0.03),对照组为(0.85±0.04),3组吸光度比值比较,差异有统计学意义(F=398.7,P0.05);其中稳转组吸光度比值高于空载组和对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。细胞划痕后18 h,对照组、空载组和稳转组细胞迁移率分别为(39.34±5.34)%、(40.56±7.54)%和(83.72±7.12)%,3组细胞迁移率比较,差异有统计学意义(F=431.8,P0.05);其中稳转组细胞迁移率高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P0.05)。各组细胞培养48 h后,对照组、空载组和稳转组迁移细胞分别为(23.33±3.63)、(22.00±8.14)、(45.67±7.14),3组迁移细胞数比较,差异有统计学意义(F=248.5,P0.05);其中稳转组迁移细胞数高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 p EGFP-PAX2质粒成功转染大鼠肾小管上皮细胞,并成功筛选出高效稳定表达PAX2的稳转细胞系。PAX2稳转增加了肾小管上皮细胞的迁移及侵袭能力。
【作者单位】： 辽宁医学院附属第一医院风湿免疫科;辽宁医学院附属第一医院耳鼻喉科;中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿免疫科;
【关键词】： PAX基因 细胞侵袭 细胞运动 肾小管 上皮细胞 大鼠
【基金】：辽宁省博士科研启动基金计划资助项目(20141136)
【分类号】：R692
【正文快照】： Study on the Construction of PAX2 Stably Transfected Cell Lines and Their Effects on Cell Migration and InvasionAbility LI Li,GONG Liang,WU Yu-bin.Department of Rheumatology and Immunology,the First Affiliated Hospital ofLiaoning Medical University,Jinzh

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 易著文,朱翠平,党西强,吴小川,何小解,何庆南;肾病综合征和急性肾炎患儿肾组织PAX2的表达及临床意义[J];医学临床研究;2005年11期

2 皮蕾;姜傥;欧阳涓;周青松;崔颖鹏;黄彬;;pax2基因在肾小管上皮细胞转分化中的作用[J];华中医学杂志;2007年01期

3 耿文茂;易著文;何小解;何庆南;党西强;曹艳;莫双红;;PAX2在肾小管上皮细胞转分化中的作用[J];临床儿科杂志;2007年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 盖建芳;谢宗德;李雯;李素萍;胡劲涛;;L-精氨酸对宫内发育迟缓大鼠肾脏Pax2表达的影响[J];中国当代儿科杂志;2011年02期

2 李里;南晓娟;吴玉斌;;WNT4基因沉默对PAX2诱导肾小管上皮细胞间充质转分化的影响[J];吉林大学学报(医学版);2013年04期

3 皮蕾;姜傥;黄彬;欧阳涓;陈培松;崔颖鹏;刘云锋;郭彩娇;;肾小管上皮细胞炎性损伤中的转分化——获得组织干细胞潜能的研究[J];国际检验医学杂志;2014年14期

4 李丽;康晓明;王显鹤;王长山;孟庆云;吴玉斌;;PAX2在梗阻性肾病大鼠中重新表达与尿β2-MG关系研究[J];黑龙江医药科学;2012年03期

5 陈静;覃远汉;赵艳君;雷凤英;胡鹏;庞玉生;冯震博;;PAX2在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的作用[J];实用儿科临床杂志;2009年05期

6 李里;吴玉斌;宫亮;;大鼠PAX2真核表达质粒构建及瞬时转染肾小管上皮细胞模型建立[J];山东医药;2012年35期

7 陈静;覃远汉;赵艳君;雷凤英;庞玉生;;PAX2和α-SMA在肾小管间质纤维化大鼠肾脏中的表达及意义[J];现代预防医学;2010年20期

8 姚勇;杨霁云;;小儿泌尿系统疾病诊治进展[J];中国实用儿科杂志;2008年05期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 陈静;PAX2基因多态性和蛋白表达与小儿过敏性紫癜相关性研究[D];中南大学;2007年

2 李丽;PAX2基因沉默在梗阻性肾病肾小管上皮细胞转分化中作用机制的研究[D];中国医科大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 陈静;PAX2在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的作用[D];广西医科大学;2009年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 朱翠平;Nephrin与肾小球滤过膜[J];国外医学.泌尿系统分册;2001年06期

2 杨红玲,伍欣星,张有顺;c-myc在消化系统肿瘤的表达及其与端粒酶活性关系的研究[J];昆明医学院学报;2002年01期

3 李志辉,易著文,何小解,吴小川;激素耐药型和激素依赖型肾病患儿肾脏病理计量分析[J];中华儿科杂志;2001年08期

4 中华医学会儿科学分会肾脏病学组 ,姚勇,杨霁云 ,陈述枚 ,丁洁;小儿肾小球疾病的临床分类、诊断及治疗[J];中华儿科杂志;2001年12期

5 文晓彦,郑法雷;肾小管上皮细胞转分化在肾间质纤维化中的作用[J];中华肾脏病杂志;1999年06期

6 姜傥,袁飞,刘云启,杜勇,周建中;Wilms瘤1基因在肾小管上皮细胞转分化中的表达及作用[J];中华肾脏病杂志;2005年08期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 万建新;郭琦;潘阳彬;崔炯;傅槟槟;许艳芳;;骨髓间充质干细胞修复损伤肾小管上皮细胞:可能与可行?[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年32期

2 李玲,邹万忠,张波,王盛兰,侯琳;病理性因素对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响[J];中华肾脏病杂志;2003年01期

3 楚非,邹万忠,孙锁柱,韩志惠,王盛兰;大鼠肾小管间质纤维化中肾小管上皮细胞表型转化的研究[J];中华肾脏病杂志;2003年01期

4 张梅,李晓玫;丝裂素激活蛋白激酶活化与肾小管上皮细胞生物学行为的关系[J];中华肾脏病杂志;2004年03期

5 罗昌霞,张建鄂,丁国华,张庆红,李涛;尿白蛋白诱导肾小管上皮细胞损伤的作用机制研究[J];实用医学杂志;2004年12期

6 唐可京,李幼姬,谢灿茂,黄顺伟,王碧飞,余学清;Fractalkine/CX3CR1介导的肾小管上皮细胞对巨噬细胞的趋化作用[J];中华内科杂志;2005年03期

7 何玉华,冯梅,梁勇,李飞燕,叶传蕙;肾小管上皮细胞表型转化在肾小管间质纤维化中的作用[J];中国中西医结合肾病杂志;2005年05期

8 张建鄂;罗昌霞;张庆红;李涛;;血管紧张素Ⅱ诱导肾小管上皮细胞损伤的实验研究[J];郧阳医学院学报;2006年05期

9 刘翔;余学清;李志坚;李军;彭文兴;聂静;;大鼠成体骨髓干细胞在肾小管上皮细胞再生中的作用[J];中国病理生理杂志;2008年01期

10 西月;陈素贤;李才;田琳;苗春生;;马兜铃酸作用下大鼠肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ含量的变化[J];疑难病杂志;2008年10期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 杨晓;张春;邓安国;朱忠华;;结缔组织生长因子在肾小管上皮细胞细胞外基质积聚中的作用[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

2 杨雅丽;程晓霞;;肾小管上皮细胞凋亡在肾间质纤维化中的作用及其防治的研究进展[A];2009全国时间生物医学学术会议论文集[C];2009年

3 谭玉莉;黄妍;杨亦彬;;鱼胆汁毒素致肾小管上皮细胞死亡方式及实施干预的试验研究[A];贵州省医学会肾脏病学分会2008年学术年会论文汇编[C];2008年

4 乔f^;陈香美;吴镝;丁瑞;师锁柱;谢院生;洪权;吕杨;王兆霞;尹忠;;衰老大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中肾小管上皮细胞不同凋亡途径的研究[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

5 海波;;环孢素A诱导肾小管上皮细胞转分化作用机制的研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

6 蔡明;袁清;朱有华;;乙醛脱氢酶2介导乙醇预处理减轻肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的作用[A];2012中国器官移植大会论文汇编[C];2012年

7 徐忠秀;秦卫松;曹香华;陈朝红;郑春霞;曾彩虹;刘志红;;二甲苯体外诱导肾小管上皮细胞和足细胞损伤的表观遗传机制研究[A];中国生理学会肾脏生理专业委员会第二届学术年会论文汇编[C];2013年

8 水华;徐联芳;;氟伐他汀对肾小管上皮细胞核因子-κB活性及炎症因子表达的影响[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

9 何丽洁;王汉民;沈青;陈威;;肾小管上皮细胞无血清同步化方法的研究[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

10 王军祥;;应用原代肾小管上皮细胞检测灵长类血型抗体水平[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 华红梅;药损肾先“知”[N];医药养生保健报;2006年

，

本文编号：955053