PPAR-γ途径在小胶质细胞表型改变中作用机制的研究

发布时间：2022-12-05 05:20

　　小胶质细胞的激活参与多种中枢神经系统疾病的发生与发展,包括抑郁症,阿尔兹海默症,孤独症谱系障碍等疾病。小胶质细胞具有M1型（经典型激活）和M2型（替代型激活）两种不同的激活表型,这两种不同激活表型的小胶质细胞在大脑中发挥着截然不同的生物学功效。M1型小胶质细胞主要表达促炎性细胞因子,扩大神经炎症响应,造成组织损伤,发挥神经毒害性作用;而M2型小胶质细胞则能够表达更多的抗炎性细胞因子以及神经营养因子,抑制神经炎症响应,促进组织修复,发挥神经保护性作用。因此,探究小胶质细胞激活表型的转换机制具有十分重要的意义。在本课题中,我们通过检测小胶质细胞在干扰素-γ（IFN-γ）处理后激活表型的变化,探究小胶质细胞在IFN-γ刺激下的自稳态调节过程,并进一步探索在此过程中的潜在分子机制。我们通过分析小胶质细胞形态学、细胞因子表达水平,以及对于神经干/祖细胞（NSPCs）增殖与分化的影响,以确定小胶质细胞处于何种激活表型。实验结果表明,IFN-γ处理一段时间后的小胶质细胞,并不是始终表现为具有神经毒性的M1激活表型,而是在IFN-γ处理48 h后,激活表型由M1型向M2型转换,表达的抗炎性细胞因子与神... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 研究背景及意义
    1.2 国内外研究现状
        1.2.1 小胶质细胞在CNS疾病中的作用
        1.2.2 不同激活表型小胶质细胞的特征
        1.2.3 PPAR-γ调控小胶质细胞激活表型
    1.3 本课题的研究目的及内容
第二章 IFN-γ激活的小胶质细胞呈现出时序相关的表型转换
    2.1 引言
    2.2 实验材料与方法
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 实验设备
        2.2.3 实验试剂来源
        2.2.4 原代小胶质细胞培养与刺激
        2.2.5 免疫荧光染色
        2.2.6 实时定量PCR
        2.2.7 酶联免疫吸附测试(ELISA)
        2.2.8 NSPCs培养
        2.2.9 小胶质细胞与NSPCs共培养
        2.2.10 条件培养基培养NSPCs
        2.2.11 数据处理与统计
    2.3 实验结果
        2.3.1 IFN-γ处理小胶质细胞的形态学变化
        2.3.2 IFN-γ处理小胶质细胞增殖能力的变化
        2.3.3 IFN-γ处理的小胶质细胞表达细胞因子的m RNA水平变化
        2.3.4 IFN-γ处理的小胶质细胞表达细胞因子的蛋白水平变化
        2.3.5 IFN-γ处理12 h、48 h的小胶质细胞对NSPCs增殖与分化的影响
        2.3.6 IFN-γ处理12 h、48 h的小胶质细胞对神经元成熟的影响
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 PPAR-γ途径参与IFN-γ激活小胶质细胞的表型转换
    3.1 引言
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 实验设备
        3.2.3 实验试剂来源及配制
        3.2.4 原代小胶质细胞给药刺激
        3.2.5 蛋白免疫印迹(Western Blot)
        3.2.6 酶联免疫吸附测试(ELISA)
        3.2.7 实时定量PCR
        3.2.8 腹腔注射
        3.2.9 侧脑室注射
        3.2.10 免疫荧光染色
        3.2.11 行为学检测
        3.2.12 数据处理与统计
    3.3 实验结果
        3.3.1 IFN-γ处理小胶质细胞中PPAR-γ表达水平的变化
        3.3.2 GW9662对IFN-γ处理的小胶质细胞表达细胞因子的影响
        3.3.3 IFN-γ与 GW9662 共处理的小胶质细胞对NSPCs增殖与分化的影响
        3.3.4 Pioglitazone对 IFN-γ处理的小胶质细胞表达细胞因子的影响
        3.3.5 IFN-γ与 Pioglitazone共处理的小胶质细胞对NSPCs增殖与分化的影响
        3.3.6 Pioglitazone调节IFN-γ诱导的神经炎症
        3.3.7 Pioglitazone改善IFN-γ诱导的小鼠异常行为
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 结论与展望
    4.1 全文总结
    4.2 后续展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]法舒地尔通过抑制脑内小胶质细胞活化并促进其M2极化而改善APP/PS1双转基因小鼠认知功能[J]. 尉杰忠,谷青芳,闫玉清,余鸿强,郭敏芳,刘春云,宋国斌,柴智,王青,肖保国,张汉霆,降雨强,马存根.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(12)



本文编号：3709761