调控CB2R-PI3K/AKT通路对幼年癫痫大鼠星形胶质细胞保护作用的机制研究

发布时间：2022-12-10 03:46

　　癫痫是一种由多种病因引起的大脑神经元异常放电所引起的以短暂脑功能异常为特点的慢性脑部疾病。该疾病会严重影响人们的生活质量,给病人带来身体及精神上的折磨,据相关统计发现有5‰-8‰的人群患有癫痫,60%癫痫患者是婴幼儿期及儿童期发病,婴幼儿期更是高发。而癫痫普遍认为是由于神经系统的兴奋性高于抑制性引起的,与神经递质失衡、离子通道、神经胶质细胞、遗传及免疫的异常有密切关系。研究显示癫痫的基本病理中发现有胶质细胞增生,形成胶质疤痕,病变处胶质细胞和纤维增生,即形成海马硬化。但同时星形胶质细胞还可以对神经元起到营养和支持的作用。现在随着研究的深入,发现星形胶质细胞可以通过调动离子和神经递质,来作用于神经元,例如调控信号通路、谷氨酸受体、水和钾、钙离子代谢、缝隙连接和炎症免疫反应,这些作用都与癫痫的发病有着密切相关。近年来,大麻素系统在癫痫中的作用越来越受到关注。大麻素系统主要由大麻素受体（cannabinoid receptor,CBR）、大麻素（endocannabinoid）和合成与降解内源性大麻素的酶等组成,而大麻素受体主要分为1型大麻素受体（CB1 receptor,CB1R）和2型大... 

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【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 ：CB2R在癫痫幼鼠海马组织的表达规律的研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 实验仪器
            2.1.3 实验试剂
        2.2 方法
            2.2.1 实验动物及分组
            2.2.2 匹鲁卡品癫痫模型的建立
            2.2.3 免疫组化检测大鼠海马和大脑皮层中CB2R的表达与定位。
    3 结果
        3.1 幼年大鼠癫痫模型建立和行为学观察
        3.2 癫痫幼年大鼠海马CB2R的表达
    4 讨论
    5 结论
第二部分 ：调控CB2R-PI3K/AKT通路对癫痫幼鼠海马组织保护机制的研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 实验仪器
        2.2 方法
            2.2.1 实验动物
            2.2.2 匹鲁卡品癫痫模型的建立
            2.2.3 尼氏染色检测癫痫持续状态后幼年大鼠海马神经元变化情况
            2.2.4 免疫组化检测癫痫幼年大鼠海马区GFAP表达
            2.2.5 Westernblot检测癫痫持续状态后幼年大鼠海马PI3K/AKT通路(PI3K,p-AKT,AKT)
    3 结果
        3.1 调控CB2R对幼年大鼠癫痫后早期行为学影响
        3.2 调控CB2R对幼年癫痫大鼠神经元的保护作用
        3.3 调控CB2R对幼年癫痫大鼠星型胶质细胞的作用
            3.3.1 CB2R对癫痫幼年大鼠海马中GFAP海马区表达
            3.3.2 CB2R对癫痫幼年大鼠的海马GFAP蛋白的影响
        3.4 调控CB2R对幼年大鼠癫痫后海马PI3K/AKT通路蛋白(PI3K、AKT,p-AKT)的影响
    4 讨论
    5 结论
第三部分 ：调控CB2R-PI3K/AKT通路对星形胶质细胞增殖活性的作用机制研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料
            2.1.1 实验细胞
            2.1.2 实验分组
            2.1.3 实验药物
            2.1.4 主要仪器
        2.2 方法
            2.2.1 星形胶质细胞细胞的复苏和培养
            2.2.2 流式细胞仪分析各组AST的细胞周期
            2.2.3 Westernblot检测无镁溶液处理AST后PI3K/AKT通路中蛋白及细胞增殖蛋白的变化情况
            2.2.4 统计分析
    3 结果
        3.1 调控CB2R对星形胶质细胞增殖活性的影响
            3.1.1 调控CB2R对星形胶质细胞增殖蛋白的影响
            3.1.2 流式细胞仪检测细胞周期
        3.2 CB2R对大鼠星形胶质细胞PI3K/AKT通路的影响
        3.3 阻断PI3K/AKT通路后星形胶质细胞增殖活性的变化
            3.3.1 Wortmannin对星形胶质细胞PI3K/AKT的影响
            3.3.2 Wortmannin处理后对星形胶质细胞增殖活性的影响
    4 讨论
    5 结论
创新性分析
参考文献
综述
    参考文献
在学期间科研成绩
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]Mutations of N-Methyl-D-Aspartate Receptor Subunits in Epilepsy[J]. Xing-Xing Xu,Jian-Hong Luo.  Neuroscience Bulletin. 2018(03)



本文编号：3715993