长链非编码RNA在多发性硬化中的研究

发布时间：2023-01-12 17:00

　　目的:长链非编码RNA在调节免疫功能方面起到重要的作用。然而这些长链非编码RNA在慢性炎性疾病,如多发性硬化中的作用机制尚不完全清楚。因此在多发性硬化病人的外周血单个核细胞中,我们检测了长链非编码RNA的表达谱,以及它们可能发挥的作用。方法:在这个研究当中,我们按照McDonald criteria诊断标准入组了26个多发性硬化患者。在这26个多发性硬化患者当中,我们随机选择6个作基因芯片高通量检测。基因芯片检测技术识别出具有表达差异的长链非编码RNA,然后我们应用实时定量PCR技术对所检测的RNA进行验证。我们应用Gene Ontology（GO）和相关性分析的方法对长链非编码RNA进行注释,使用Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）的方法,对长链非编码RNA富集的通路进行分析。并且使用“cis”和“trans”的模型对长链非编码RNA和编码RNA之间的调控关系进行阐述。结果:与健康对照的外周血单个核细胞相比,在多发性硬化患者中,我们检测到了2353条表达上调的长链非编码RNA,389条下调的长链非编码RNA,1037条上调的mRN... 

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要 1
Abstract 1
中文摘要 2
Abstract 2
中文摘要 3
Abstract 3
缩略语/符号说明
第一部分 多发性硬化病人单个核细胞长链非编码RNA的表达谱
    前言
        研究现状、成果
        研究目的、方法
    1.1 对象和方法
        1.1.1 研究人群和实验设计
        1.1.2 外周血单个核细胞的提取
        1.1.3 RNA的提取和基因芯片技术
        1.1.4 实时定量PCR验证
        1.1.5 长链非编码RNA的共表达分析以及基因功能富集
        1.1.6 靶基因预测
    1.2 结果
        1.2.1 长链非编码RNA和编码RNA在多发性硬化中的表达谱
        1.2.2 多发性硬化中差异基因表达的验证
        1.2.3 长链非编码RNA的功能富集
        1.2.4 差异表达长链非编码RNA的“Trans”调控
    1.3 讨论
    1.4 小结
    参考文献
第二部分 Linc-MAF-4通过MAF调节Th1/Th2分化参与到多发性硬化的发病机制中
    前言
        研究现状、成果
    2.1 对象和方法
        2.1.1 研究人群和实验设计
        2.1.2 外周血单个核细胞的分离
        2.1.3 T细胞的体外分化实验
        2.1.4 腺病毒的转染
        2.1.5 胞内细胞因子的染色
        2.1.6 RNA的提取和实时定量PCR
        2.1.7 ELISA
        2.1.8 临床评估
        2.1.9 影像学
        2.1.10 统计分析
    2.2 结果
        2.2.1 基因芯片分析显示在多发性硬化病人PBMC中linc-MAF-4表达上调,而MAF表达下调
        2.2.2 Linc-MAF-4和MAF的表达分别受Th1和Th2分化的诱导……
        2.2.3 在多发性硬化中T细胞向Th2分化时linc-MAF-4表达下调
        2.2.4 Linc-MAF-4可以促进多发性硬化CD4+T细胞的激活
        2.2.5 存在linc-MAF-4高表达的多发性硬化病人有更高的年复发率和更多的中枢病灶
    2.3 讨论
    2.4 小结
    参考文献
第三部分 DDIT4和相关的lncDDIT4通过DDIT4/TSC/mTOR通路调节Th17细胞的分化
    前言
        研究现状、成果
        研究目的、方法
    3.1 对象和方法
        3.1.1 研究对象
        3.1.2 外周血单个核细胞的分离
        3.1.3 T细胞的体外分化实验
        3.1.4 腺病毒的转染
        3.1.5 胞内细胞因子的染色
        3.1.6 RNA的提取和实时定量PCR
        3.1.7 ELISA
        3.1.8 Western Blot
        3.1.9 统计分析
    3.2 结果
        3.2.1 基因芯片分析表明lncDDIT4和DDIT4在多发性硬化患者PBMC中表达上调
        3.2.2 DDIT4mRNA和lncDDIT4的表达主要受Th17细胞分化诱导……
        3.2.3 在体外实验中DDIT4mRNA和lncDDIT4抑制了Th17细胞的分化
        3.2.4 在多发性硬化中lncDDIT4通过直接作用于DDIT4抑制了Th17细胞的分化
        3.2.5 LncDDIT4抑制DDIT4/mTOR信号通路
        3.2.6 LncDDIT4通过作用于DDIT4抑制DDIT4/mTOR信号通路
    3.3 讨论
    3.4 小结
    参考文献
全文结论
论文创新点
发表论文和参加科研情况说明
综述 趋化因子在中枢神经系统中的作用
    前言
    1 CX3CL1/CX3CR1
        1.1 CX3CL1/CX3CR1的结构
        1.2 CX3CL1/CX3CR1在人类中枢神经系统的分布
        1.3 CX3CL1/CX3CR1和血脑屏障的通透性
        1.4 CX3CL1/CX3CR1和神经保护
        1.5 CX3CL1/CX3CR1和多发性硬化
        1.6 CX3CL1/CX3CR1和卒中
        1.7 CX3CL1/CX3CR1和类风湿关节炎
    2 CXCL12/CXCR4
        2.1 CXCL12的结构
        2.2 CXCL12/CXCR4在人类中枢神经系统的分布
        2.3 CXCL12/CXCR4和血脑屏障的通透性
        2.4 CXCL12/CXCR4和神经保护
        2.5 CXCL12/CXCR4和多发性硬化
        2.6 CXCL12/CXCR4和卒中
    3 CCL2/CCR2
        3.1 CCL2的结构
        3.2 CCL2/CCR2在人类中枢神经系统的分布
        3.3 CCL2/CCR2和血脑屏障的通透性
        3.4 CCL2/CCR2和神经保护
        3.5 CCL2/CCR2和多发性硬化
        3.6 CCL2/CCR2和卒中
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3730177