GAS41在神经胶质瘤中的表达及其RNA干扰慢病毒载体的构建

发布时间：2023-02-06 17:26

　　目的：检测胶质瘤扩增序列41(Glioma-amplified sequence41, GAS41)基因在不同病理级别的神经胶质瘤组织及神经胶质瘤细胞系中的表达,探讨GAS41基因在神经胶质瘤发展中的作用。 方法：(1)采用免疫组织化学染色法、Western blot从蛋白水平检测30例不同病理级别的神经胶质瘤组织中GAS41的表达情况。 (2)通过Western blot检测神经胶质瘤细胞系中GAS41的表达情况,并通过分子克隆技术构建GAS41基因的RNA干扰慢病毒载体GV118-GAS41-RNAi,连同包装质粒pHelper1.0和包膜质粒pHelper2.0共同转染293T包装细胞,收集储存可表达GAS41特异性干扰慢病毒载体的病毒颗粒并进行滴度测定。 结果：(1)GAS41蛋白在高级别神经胶质瘤组织中的表达强于低级别神经胶质瘤组织,且差异有统计学意义(P=0.011<0.05)。 (2)GAS41在神经胶质瘤细胞系A172中表达较高,构建的GAS41干扰慢病毒载体GV118-GAS41-RNAi经PCR鉴定和测序,结果与设计序列完全相符,慢病毒重组载体构建成功,将GV...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 GAS41在神经胶质瘤组织中的表达及意义初探
    1 实验材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 免疫组织化学检测各级别神级胶质瘤中GAS41蛋白的表达
        2.2 免疫组织化学检测结果的评分统计
        2.3 Western Blot检测各级别神级胶质瘤中GAS41蛋白的表达
    3 讨论
    4 结论
第二部分 高表达GAS41细胞系的筛选GAS41 RNA干扰慢病毒的载体构建
    1 实验材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 Western Blot检测神经胶质瘤细胞系中GAS41蛋白的表达
        2.2 阳性克隆PCR电泳结果
        2.3 阳性克隆DNA测序结果
        2.4 慢病毒载体的包装及滴度测定
    3 讨论
    4 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间主要研究成果
中英文缩略词对照表
致谢



本文编号：3736314