组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胶质瘤U251抑制作用的研究

发布时间：2024-01-20 19:29

　　胶质瘤是神经外科中最富有挑战性的肿瘤之一，其发病率约占颅内肿瘤总数40%左右。目前治疗方法主要采用综合疗法，但由于肿瘤呈浸润生长，手术很难判定肿瘤边界，放疗对正常组织损伤较大，一些经典胶质瘤化疗药物由于血脑屏障存在及胶质瘤对这些药物存在耐药性，治疗效果也不十分明显。因此，寻求有效的化疗药物提高胶质瘤患者的生存率就成为目前一个重要的研究目标，对以组蛋白乙酰化酶为靶点的化疗药物的研究就是一个重要方向。 正常细胞的分化以及代谢行为的调节依赖组蛋白乙酰基转移酶和组蛋白去乙酰化酶之间的平衡。一旦这种平衡关系被打破，细胞或组织就容易发生癌变，神经胶质瘤也不例外，组蛋白去乙酰化酶抑制剂通过阻碍细胞周期、诱导细胞分化和凋亡以及抑制肿瘤血管生成从而抑制肿瘤的生长和增殖，目前在胶质瘤中的机制还不清楚。 本课题通过体外试验探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响，同时检测增殖和凋亡相关基因表达的变化，初步探讨其在治疗神经胶质瘤的作用及其机制。 实验目的：通过体外培养神经胶质瘤U251细胞，观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂帕比司他(LBH589)对细胞生长和增殖的影响及其作用机制，为临床治疗神经胶...

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Abstract
英文缩写表
第1章 绪论
第2章 文献综述
    2.1 组蛋白的乙酰化和去乙酰化与基因表达调控的概述
        2.1.1 核小体结构及作用
        2.1.2 组蛋白乙酰基转移酶
        2.1.3 组蛋白乙酰基转移酶对染色质结构及基因转录的作用
        2.1.4 组蛋白去乙酰化酶
        2.1.5 HDACs 对染色质结构和转录调控的影响
    2.2 HDACs 在肿瘤中的发病机制
        2.2.1 HDACs 诱导染色质重塑，抑制基因转录
        2.2.2 HDACs 作用于细胞周期的相关因子，影响细胞增殖与分化
        2.2.3 HDACs 用于细胞凋亡的相关蛋白，从而影响细胞凋亡过程
        2.2.4 HDACs 可联合血管生成因子，影响肿瘤组织血管移行与形成
    2.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂
        2.3.1 脂肪酸类
        2.3.2 苯胺类
        2.3.3 异羟肟酸类
        2.3.4 环肽类
    2.4 HDACI 的抗肿瘤作用机制
        2.4.1 HDACI 和细胞周期
        2.4.2 细胞凋亡的死亡受体途径
        2.4.3 细胞凋亡的线粒体途径
        2.4.4 活性氧的产生
        2.4.5 抑制血管生成
        2.4.6 自我吞噬
    2.5 前景与展望
第3章 实验材料与方法
    3.1 细胞株
    3.2 试剂与仪器
        3.2.1 试剂
    3.3 仪器
    3.4 主要试剂的配制
        3.4.1 PBS 缓冲液
        3.4.2 MTT 的配制
        3.4.3 IMDM 培养基
        3.4.4 胰蛋白酶液的配制
    3.5 试验方法
        3.5.1 细胞培养
        3.5.2 实验分组
        3.5.3 MTT 法检测细胞存活率
        3.5.4 RT-PCR 法检测 bcl-2、Bax 和 caspase-3 mRNA
        3.5.5 Hoechst 33342 检测细胞凋亡
        3.5.6 Western blot 检测 U251 细胞 Bax、bcl-2 和 caspase-3 蛋白表达水平
    3.6 统计学分析
第4章 实验结果
    4.1 MTT 检测 U251 细胞增殖率
    4.2 RT-PCR 电泳检测 Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA 水平
    4.3 Hoechst 33342 检测细胞凋亡
    4.4 Western blotting 检测 Bax/Bcl-2 蛋白表达水平
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所得的科研成果
致谢



本文编号：3881422