miR-155在ApoE -/- 小鼠颈动脉粥样硬化中的表达及雷帕霉素的干预作用

发布时间：2024-03-17 04:38

　　目的:目前认为颈动脉粥样硬化是复杂的炎症性代谢增生性血管性疾病,是脑血管病发生的主要发病机制。动脉粥样硬化的疾病的发生和发展受多种因素的影响,如炎症细胞的浸润、高脂因素和细胞自噬等。据报道micro RNAs(mi Rs)能够靶向调控相关目的蛋白基因,调控动脉粥样硬化病理生理的某个阶段。已有的研究指出巨噬细胞或肿瘤细胞中的mi R-155能够靶定位于相关自噬蛋白基因从而调控自噬的活性,而动脉粥样硬化斑块组织中mi R-155的表达及其与自噬关系如何却很少有报道。因此,我们的研究主要是为了探讨mi R-155及自噬相关蛋白基因在Apo E-/-小鼠颈动脉粥样硬化中的表达,以及雷帕霉素的干预作用。方法:将36只8周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为对照组,模型组及雷帕霉素组,(每组12只)。对照组给予(右颈总动脉旁套管术,0.5 mg/kg/d PBS灌胃;模型组给予(右颈总动脉套管术,0.5 mg/kg/d PBS灌胃),雷帕霉素组给予(右颈总动脉套管术,0.5mg/kg/d雷帕霉素灌胃),所有小鼠给予西方饮食(0.25%胆固醇+15%脂肪),自由饮水8周。术后8周末处死三组小鼠,并检测...

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 实验动物
    2 主要仪器设备
    3 主要试剂与药品
    4 实验动物分组
    5 ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化模型的建立
    6 雷帕霉素的配制及给予方式
    7 血脂水平测定
    8 颈总动脉组织病理观察及透射电镜观察超微结构
    9 RNA提取及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
        9.1 颈总动脉斑块组织总RNA提取
        9.2 cDNA的合成
        9.3 qRT-PCR
    10 Western Blot检测LC3-Ⅱ,p-mTOR, mTOR的蛋白水平
        10.1 试剂配制
        10.2 蛋白样品的提取
        10.3 BCA法检测蛋白浓度
        10.4 做胶前的准备
        10.5 配制分离胶和浓缩胶
        10.6 上样及SDS-PAGE凝胶电泳
        10.7 切胶
        10.8 转膜
        10.9 封闭
        10.10 孵育抗体
        10.11 显色
    11 统计学分析
结果
    1 动物体血脂水平检测结果
    2 颈动脉内膜病理学改变
    3 组织透射电镜（TEM）下观察颈动脉斑块中自噬体数目变化
    4 颈动脉斑块中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达变化
    5 颈动脉斑块中miR-155 的表达变化
    6 颈动脉斑块中mTOR、p-mTOR相对蛋白表达水平的变化
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
在学期间参加的研究项目
缩略词表（附录）
致谢



本文编号：3930521