重组慢病毒介导PPM1B基因转染延缓大鼠失神经骨骼肌萎缩的基础研究

发布时间：2024-11-02 16:18

　　肌萎缩是公认的世界疑难病症，以失神经肌萎缩为例，其一旦发生则呈进行性不可逆发展，目前尚无有效措施及药物可完全阻断这一病程，给患者及其家庭带来了沉重的精神和经济负担。因此,探讨失神经肌萎缩发病的分子机制及寻找新的治疗方法显得尤为重要和迫切。迄今的研究已经明确，失神经骨骼肌的萎缩是由分子信号通路掌控，IKKβ/NF-κB通路在其中占有重要的作用。磷酸化的IKKβ去磷酸化与否可能对失神经骨骼肌的发生发展有重要意义。依赖镁/锰离子的蛋白磷酸酶1B （PPM1B）可以使磷酸化的IKKβ的丝氨酸177和丝氨酸181位点发生去磷酸化，同时减弱IKKβ的活性。过表达PPM1B甚至可以终止由TNF-α诱导的IKKβ/NF-κB通路的活性。基因治疗为失神经骨骼肌萎缩的防治开辟了更广阔的前景，已有学者发现应用神经营养因子、转化生长因子等基因转染和转基因小鼠的方法对延缓肌萎缩有较好的效果。受此启发，本课题尝试采用基因转染技术来促进PPM1B基因过表达，使失神经肌萎缩的重要通路在上游及时得到控制，借此来抑制IKKβ/NF-κB通路的活性，探讨其延缓骨骼肌萎缩的疗效，为进一步研究失神经骨骼肌萎缩的分子机制及针对该因...

【文章页数】：89 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

山西医科实验结果1BmRNA在大鼠失神经腓肠肌不同时段的表达变化-PCR荧光扩增曲线图显示其呈典型的“S”形，包括荧光背景信号阶阶段和平台期三个阶段，见图1；其熔解曲线显示PPM1B在85℃附近表了扩增产物的Tm值，表明了PCR扩增的特异性，见图2；相对定量mRNA的表达在失神....

图2PPM1B的mRNA实时定量PCR荧光溶解曲线图PPM1B在85℃附近出现光滑的单峰，代表了扩增产物的Tm值，表明了PCR扩增的特异性

20图3PPM1B的mRNA实时定量PCR结果和P-IKKβ，IKKβ蛋白在大鼠失神经腓肠肌不同时段表达变化rnblot分析结果显示：PPM1B在蛋白表达水平的变化规律与转录是变化幅度较转录水平为低；从失神经后第2天开始表达水平持续的0.56倍，到第28天时降为对照组的0.....

山西医科大学博士学位论文推移而呈持续增加趋势，到第28天为对照组的1.74倍。各组与对照组相比差异均具有统计学意义（P＜0.05）。IKKβ蛋白的表达呈持续下降的趋势，下降幅度较小。各组与对照组相比差异均具有统计学意义（P＜0.05）。见图4，图5，表2。图4PPM1B,P-I....

本文编号：4009787