HOTAIR-EZH2抑制剂AC1Q3QWB通过上调CWF19L1增强CDK4/6抑制剂palbociclib对胶质瘤的

发布时间：2025-02-07 20:38

　　背景:胶质母细胞瘤(GBM)是颅内最常见的原发性肿瘤,GBM患者的中位生存时间仅为14个月左右,因此迫切需要新的以及更有效的治疗策略。由于细胞周期紊乱是肿瘤进展和永生化的关键因素,因此在胶质母细胞瘤患者中控制肿瘤细胞的细胞周期紊乱是有巨大潜力的。我们开始研究AQB和palbociclib的新型组合,以评估其作为新治疗靶标的潜力。方法:蛋白质谱分析AQB处理后上调的蛋白表达情况,TCGA、CGGA数据库分析CWF19L1和胶质瘤级别以及预后相关性,通过ChIP-qPCR实验分析CWF19L1启动子区域的组蛋白修饰情况,通过平板克隆以及CCK-8了解胶质瘤细胞增殖情况,双染法流式细胞周期检测胶质瘤细胞周期分布情况。结果:AQB和palbociclib抑制剂的组合对细胞周期具有更明显的抑制作用,特别是在HOTAIR和EZH2高表达且CWF19L1低表达的神经胶质瘤中。我们的实验结果表明CWF19L1受H3K27ac调节,因此CWF19L1可明显被AQB上调并导致CDK4/6降解,从而导致G1阻滞。与单一药物相比,AQB和CDK4/6抑制剂palbociclib的组合在体内和体外均表现出更有效的...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 前言
第2章 实验材料和实验方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 公共数据库
        2.1.2 细胞系来源
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验器材
    2.2 实验方法
        2.2.1 临床样本数据分析
        2.2.2 细胞复苏、换液、传代及冻存
        2.2.3 质粒的构建和转染
        2.2.4 RNA提取、实时荧光定量PCR
        2.2.5 蛋白质提取和Western Blot实验
        2.2.6 CWF19L1 小干扰RNA的感染
        2.2.7 CWF19L1 过表达质粒的转染
        2.2.8 CCK-8 细胞毒性及增殖能力检测
        2.2.9 Transwell实验
        2.2.10 流式细胞周期检测
        2.2.11 流式细胞凋亡检测
        2.2.12 裸鼠颅内原位成瘤
        2.2.13 HE染色
        2.2.14 免疫组化技术
        2.2.15 染色质免疫沉淀技术
    2.3 统计方法
第3章 实验结果
    3.1 AQB促进抑癌基因CWF19L1 表达
    3.2 CWF19L1 功能分析提示其功能和抑癌作用相关
    3.3 CWF19L1 的表达与神经胶质瘤的等级和患者的预后有关
    3.4 CWF19L1 在神经胶质瘤细胞增殖中的关键作用
    3.5 CWF19L1 在神经胶质瘤细胞周期中的关键作用
    3.6 联合应用AQB可以增强palbociclib的体外增殖抑制作用
    3.7 AQB和 palbociclib联合应用抑制神经胶质瘤细胞迁移
    3.8 AQB和 palbociclib的组合在体内抑制肿瘤形成
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：4031268