SVF及ADSCs对乳鼠背根神经节生长影响的实验研究

发布时间：2017-06-09 00:01

  本文关键词：SVF及ADSCs对乳鼠背根神经节生长影响的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:周围神经修复一直是临床医生不得不面对的难题。近年来,国内国外科研工作者都对作为自体神经移植替代材料的组织工程神经进行了深入研究。脂肪血管基质成分(Stromal vascular fraction,SVF)是脂肪组织中一团富含前体脂肪细胞(Preadipocytes)、骨髓基质细胞(Bone marrow derived mesenchymal stromal cells,MSC)、内皮祖细胞(Endothelial progenitor cell)、T细胞、B细胞、肥大细胞和脂肪组织巨噬细胞的细胞集群组织。其来源丰富,容易培养扩增,具有极好的分化增殖能力、促进血管化能力以及不会增加炎症感染的风险。SVF的作用相关研究在临床及科研中逐渐增加。目的:SVF因含有大量干细胞及基质细胞,应用于多领域的治疗,但尚未有文章指出SVF对周围神经损伤修复的促进作用。本实验旨在研究SVF及ADSCs对周围神经损伤修复是否具有促进作用。方法:取200g雄性SD大鼠4只,提取两侧腹股沟脂肪组织,离心得SVF,经体外培养扩增ADSCs。按照变量不同将实验分为3组,A组SVF组(1×106cells/20ul)、B组ADSCs组(1×106 cells/20ul)、C组空白对照组。A、B两组加入12小时内SD乳鼠背根神经节内共培养。48h后通过形态学观察,神经丝蛋白200免疫荧光染色,对SD乳鼠DRG轴突生长长度、雪旺细胞迁移距离和轴突面积指数进行定量评价。结果:1.DRG培养48h后,A、B两组DRG轴突生长长度和雪旺迁移距离相比均具有统计学差异(P0.05)。2.A、B两组DRG轴突生长长度和雪旺迁移距离均大于C组,差异具有统计学意义(P0.05)。3.A、B、C三组DRG轴突面积指数具有统计学差异(P0.05)。结论:1.SVF及ADSCs成分都可以促进背根神经节轴突生长及雪旺细胞的迁移。2.SVF在促进背根神经节轴突生长的方面比ADSCs更加有效。3.SVF可以应用于修复周围神经损伤。4.使用生物蛋白胶包被爬片可以成功制成并简化乳鼠DRG模型制作程序。
【关键词】：脂肪血管基质成分 背根神经节培养 神经再生 组织工程神经 乳鼠
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R745
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文缩写词表11-12
• 第1章 绪论12-13
• 第2章 综述13-20
• 2.1 干细胞研究历史13
• 2.2 骨髓间充质干细胞13
• 2.3 脂肪血管基质成分和脂肪基质细胞的研究背景13-14
• 2.4 脂肪组织中分离SVF14
• 2.5 SVF应用于组织移植14
• 2.6 SVF应用于治疗勃起功能障碍14-15
• 2.7 ADSCS及SVF进行细胞治疗的优劣15
• 2.8 SVF注射治疗改善移植脂肪组织的血管化15
• 2.9 SVF注射治疗肌腱损伤15-16
• 2.10 SVF关节腔注射缓解膝关节骨性关节炎16
• 2.11 SVF治疗跖距骨骨软骨病16-17
• 2.12 SVF注射治疗髋关节发育不良17
• 2.13 SVF注射治疗修复大面积组织缺损17-18
• 2.14 SVF治疗难愈性创面18
• 2.15 小结18-20
• 第3章 材料与方法20-29
• 3.1 脂肪干细胞原代培养20-23
• 3.1.1 实验名称20
• 3.1.2 实验目的20
• 3.1.3 实验材料20
• 3.1.4 实验动物20
• 3.1.5 试剂的配置20-21
• 3.1.6 实验方法21-22
• 3.1.7 实验图片22-23
• 3.2 背根神经节的获取及培养23-25
• 3.2.1 实验名称23
• 3.2.2 实验目的23
• 3.2.3 实验材料23
• 3.2.4 实验动物23
• 3.2.5 实验步骤23-25
• 3.2.6 实验照片25
• 3.3 12孔板生物蛋白胶包被25-26
• 3.3.1 实验名称25
• 3.3.2 实验目的25-26
• 3.3.3 实验材料26
• 3.3.4 实验过程26
• 3.4 背根神经节免疫荧光染色26-27
• 3.4.1 实验名称26
• 3.4.2 实验目的26
• 3.4.3 实验材料26-27
• 3.4.4 实验过程27
• 3.5 不同数量SVF/ADSCS制备及分组27-28
• 3.6 观测指标28
• 3.7 统计学方法28-29
• 第4章 结果29-32
• 4.1 DRG及ADSCS细胞形态学观察29
• 4.2 免疫荧光染色观察29
• 4.3 DRG轴突生长长度和雪旺细胞迁移距离测量29-30
• 4.4 DRG培养光镜及免疫荧光染色照片30-32
• 第5章 讨论32-36
• 第6章 结论36-37
• 参考文献37-41
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果41-42
• 致谢42

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本文编号：433976