PLGA的不同组成对支架材料性能的影响研究
本文关键词:PLGA的不同组成对支架材料性能的影响研究,由笔耕文化传播整理发布。
赵莉等:PLGA的不同组成对支架材料性能的影响研究
23
1.5降解实验
别取材,做M1’r增殖实验,方法同上。该实验每个时间将样品裁成3cm×1.5cm的尺寸,浸泡于pH=7.2点设4个平行对照孔。结果表示为平均值4-标准差,的磷酸盐缓冲溶液(phosphate
bufferedsolution,PBS)
显著性差异通过学生氏t检验进行判断,以P<0.05为
中,然后置于真空干燥箱中反复抽真空,使样品充分润有统计学意义。
湿。将完全浸润的样品放置于六孔培养板内,加入定1.6.3
总胶原含量总胶原含量是通过测定羟脯氨
量PBS溶液,放入37℃恒温箱内。于实验后0,1,2,3,酸的含量来间接测定的。羟脯氨酸在胶原蛋白中占4,6,8,10周取样,去离子水冲洗,冷冻干燥后进行重量13.4%,在弹性蛋白中占极少量,其它蛋白中均不存损失、拉伸强度及SEM检测。
在,因此羟脯氨酸的量能反映结缔组织疾病的胶原代
重量损失通过公式L=(Wo-W。)/wo
X
100%来计
谢情况。采用南京建成生物工程研究所的羟脯氨酸算,其中wo是降解前质量,w。是降解不同时间后的质
(Hyp)测试盒(A030)来测定,其原理是样品在氯化亚量。
锡的盐酸溶液中水解,释放出羟脯氨酸。羟脯氨酸在1.6细胞实验
氧化剂的作用下产生的氧化物与对二甲氨基苯甲醛反原代培养的人真皮成纤维细胞体外传代培养至5应生成紫红色化合物,根据其呈色的深浅可推算出其—10代,待细胞铺满培养皿底部时,,用0.25%胰酶消化含量。
成2×106个/ml细胞悬液,按2
X
104/l、/cm2的密度接
细胞一材料复合物处理前,进行组织称重,研磨后种于灭菌处理好的材料表面,待细胞黏附2h后,加入于生理盐水中匀浆,3500r/min离心10min,取上清,稀足量的DMEM+10%小牛血清(FBS)细胞培养液培养,释后检测液。按照试剂盒说明书方法消化,并设立标隔天换液。
准管及空白管。混匀,60℃水浴15min,冷却后,3500r/1.6.1
细胞粘附样品剪裁成lcm×Icm的尺寸,经
rain离心lOmin,取上清液在550nm处,测各管吸光度。75%的酒精浸泡,培养液浸润后用于细胞接种。细胞接根据公式计算羟脯氨酸的含量。
种材料2Ah后,每孔加入100山5ms/m1噻唑蓝(3-(4,5一
1.6.4扫描电镜(scanningelectronmicroscopy,SEM)
dimcthylthioazol-2-y1)-2,5一diphenyl—tetrazoliumbromide,
观察细胞一材料复合物培养3,7天后,用PBS洗去MYr)溶液,37℃恒温培养箱反应4h,将复合物移至新的残余培养液,放入2.5%戊二醛溶液固定,锇酸后固定,24孔板,二甲基亚砜(dimethylsuffoxide,DMSO)溶出材梯度乙醇脱水后,l临界点干燥,离子溅射仪喷金镀膜
料上的细胞内的结晶紫,在DIAreader(Elx
800G,
后,在HitachiS-450扫描电镜上观察细胞的粘附和增
DIALAB
GMBH,Vienna,Austria)上,以490hm波长测溶
殖情况。
出物吸光值。用已知浓度(0.25
X
104
4"/lIll,0.5
X
104
4"/ml,4×104ⅣlIll)培养
2
结果
爪/ml,1X104个/I【11,2×104
24h的单层细胞测吸光值,得到细胞数.1吸光值标准曲线。通过溶液浇注/颗粒沥滤法制备出的PLGA支架,依据标准曲线求出细胞在材料上的黏附率。该实验重复孑L结构均匀,孔径在40—2001LLm之间,连通孔径较小,3次,每次实验设4个平行对照孑L。
约在10—401山m之间。三种比例的PLGA支架在孑L结1.6.2细胞增殖在细胞接种材料后的1,3,5,7天分
构上没有差异(图1)。
图1三种不同比例的PLGA多孔支架的SEM照片
Fig.1
SEMmicrographs
ofporousPLGAscaffoldswithdifferentinitialcopolymer
compositions
本文关键词:PLGA的不同组成对支架材料性能的影响研究,由笔耕文化传播整理发布。
本文编号:185954
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/185954.html