左旋聚乳酸/明胶纳米纤维支架的细胞相容性研究

发布时间：2020-12-05 22:31

　　目的：通过静电纺丝技术制作左旋聚乳酸/明胶（PLLA/Gelatin）三维多孔纳米纤维支架，并评价该纳米纤维支架与软骨细胞的细胞相容性，对其作为软骨组织工程支架进行可行性分析，为组织工程技术修复软骨病变缺损提供实验依据。方法:首先将PLLA和Gelatin按照质量分数比为3:7的比例加入配置好的HFIP/DMF（98:2）溶液中，配置终浓度为10%的纺丝溶液。在特定的工作参数下（工作电压15kV，接受距离18cm，注射泵推动注射器内液体的流动速度为30μL/h，空气湿度在60-75%左右，室温25℃左右），使用静电纺丝设备制备PLLA/Gelatin纳米纤维支架。采用扫描电子显微镜（SEM）分析所制备的支架的表面形貌，直径分布等。提取兔膝关节软骨细胞并传代，将二代软骨细胞接种至已经消毒好的PLLA/Gelatin支架上，然后通过DAPI荧光染色进行观察软骨细胞在该支架上的粘附分布，并用二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测细胞在该支架上的增殖，并通过HE染色和阿尔新蓝-核固红双染法观察软骨细胞在支架上的生长情况和分泌软骨特异性细胞外基质的能力。结果：通过静电纺丝技术制备的PLLA/Gelat... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肉眼观察Fig3.1Visualstudy

图 3.2 扫描电镜观察Pig3.2 Scanning electron microscopy0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.40510152025mean：0.833stdev：0.178umberNfoibersfDiamter（μm）

90%的软骨细胞都能完成贴壁，软骨细胞变暗并且软骨细胞的形态从椭圆形逐步变成多角形，并呈现结节状聚集生长。原代软骨细胞传代后，细胞多在 4-6h 左右全部完成贴壁，软骨细胞呈多角形，传至第二代时候，细胞大多数为三角形，呈分散生长的特点，较少聚集形成软骨结节。随着传代次数的增加，细胞增殖能力逐渐下降，细胞形态逐渐变为长梭形，呈现“成纤维细胞”样形态，甚至形成肥大的不规则形态，表现出明显的去分化、肥大老化状态。

【参考文献】：
期刊论文
[1]运动性关节软骨缺损支架材料的选择及其生物相容性[J]. 王向春.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(12)
[2]医学组织工程在骨科临床中的应用[J]. 吕刚.  辽宁医学院学报. 2009(06)



本文编号：2900198