不同结构胶原材料对骨髓间充质干细胞生长和分化影响的研究
发布时间：2020-12-18 02:42
软组织严重损伤时,难以通过自我修复,实现组织结构的重建和功能的恢复。异体移植是临床上帮助组织进行修复和重建的重要方案。目前已有多种生物合成材料作为组织工程支架用于组织修复,但这些合成材料对细胞的亲和力较差,诱导细胞在材料表面粘附、生长及分化能力弱。相反,天然胶原蛋白材料因其独特的生物活性因子、良好的细胞相容性以及和正常组织类似的结构,成为目前较为理想的组织工程支架材料。肌腱组织含有丰富的胶原蛋白且具有良好的力学特性,是组织工程支架研究的热点。目前的研究发现,利用脱细胞肌腱支架结合骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植的方式能促进损伤肌腱的修复,并且胶原纤维的排列方式对干细胞分化具有重要的调控作用。因此本课题利用大鼠尾肌腱组织制备胶原纤维定向和随机排列的脱细胞支架作为载体,在不同血清浓度条件下,探讨不同支架对BMSCs分化的影响,以期利用肌腱ECM模拟干细胞分化微环境,从而调节干细胞的生物学行为,促进BMSCs向肌腱细胞定向分化,促进肌腱再生。本研究发现:(1)生长在定向和随机排列胶原支架上的BMSCs活性良好;(2)在定...
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院)广东省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓间充质干细胞形态观察
图 2.2 流式细胞仪检测干细胞相关标记物的表达。Figure 2.2 Stemness characteristics of BMSCs by FACS（左图：CD44、CD90 干细胞表面标记物；右图：CD45 淋巴细胞标记物，CD106 内皮细胞标记物） BMSCs 成骨和成软骨诱导成软骨诱导培养基培养 14 天后，利用番红 O 染色证明 BMSCs 具有成能力，如图 2.2A 和 C 所示；在使用成骨诱导培养基一段时间后，观察态发生明显变化，由梭形变为椭圆形和方形；培养 1 周后，大约 80%以形态呈不规则多角形，细胞基质中能明显观察到钙化斑；培养 2 周后中有多层小结结构，矿化物明显，并形成钙化结节。成骨诱导培养的 B素红染色鉴定，钙化结节呈红色，如图 2.2B 和 D 所示，证明分离纯
图 2.3 BMSCs 多分化能力检测。Figure 2.3 Multi-differentiation potential evaluation of BMSCs（A，C）番红 O 染色；（B，D）茜素红染色。标尺：左图 100μm，右图 50μm.4 小结与讨论本章通过贴壁培养法，获取具有多能性的大鼠 BMSCs。BMSCs 具有无限增的能力，因此是组织工程的理想种子细胞。目前骨髓间充质干细胞的体外分离法有很多种，主要包括：流式细胞分离法、免疫磁珠分离法、密度梯度离心法全骨髓贴壁法，但是结合分离效率，细胞活性，操作的难易程度等考虑，全骨和密度离心法更适合分离 BMSCs。根据骨髓间充质干细胞的贴壁特性，骨髓单核细胞提取物贴壁培养法通过定更换培养液除去悬浮的造血干细胞，从而获取纯化的 BMSCs。采取此方法时，
【参考文献】：
期刊论文
[1]RGD肽对天然瓣膜支架细胞黏附性能的影响[J]. 史嘉玮,董念国,孙宗全. 生物医学工程学杂志. 2008(02)
[2]运动员前交叉韧带损伤的流行病学研究[J]. 敖英芳,田得祥,崔国庆,胡跃林,史和福,任玉衡. 体育科学. 2000(04)
本文编号：2923192
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院)广东省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓间充质干细胞形态观察
图 2.2 流式细胞仪检测干细胞相关标记物的表达。Figure 2.2 Stemness characteristics of BMSCs by FACS（左图：CD44、CD90 干细胞表面标记物；右图：CD45 淋巴细胞标记物，CD106 内皮细胞标记物） BMSCs 成骨和成软骨诱导成软骨诱导培养基培养 14 天后，利用番红 O 染色证明 BMSCs 具有成能力，如图 2.2A 和 C 所示；在使用成骨诱导培养基一段时间后，观察态发生明显变化，由梭形变为椭圆形和方形；培养 1 周后，大约 80%以形态呈不规则多角形，细胞基质中能明显观察到钙化斑；培养 2 周后中有多层小结结构，矿化物明显，并形成钙化结节。成骨诱导培养的 B素红染色鉴定，钙化结节呈红色，如图 2.2B 和 D 所示，证明分离纯
图 2.3 BMSCs 多分化能力检测。Figure 2.3 Multi-differentiation potential evaluation of BMSCs（A，C）番红 O 染色；（B，D）茜素红染色。标尺：左图 100μm，右图 50μm.4 小结与讨论本章通过贴壁培养法，获取具有多能性的大鼠 BMSCs。BMSCs 具有无限增的能力，因此是组织工程的理想种子细胞。目前骨髓间充质干细胞的体外分离法有很多种，主要包括：流式细胞分离法、免疫磁珠分离法、密度梯度离心法全骨髓贴壁法，但是结合分离效率，细胞活性，操作的难易程度等考虑，全骨和密度离心法更适合分离 BMSCs。根据骨髓间充质干细胞的贴壁特性，骨髓单核细胞提取物贴壁培养法通过定更换培养液除去悬浮的造血干细胞，从而获取纯化的 BMSCs。采取此方法时，
【参考文献】：
期刊论文
[1]RGD肽对天然瓣膜支架细胞黏附性能的影响[J]. 史嘉玮,董念国,孙宗全. 生物医学工程学杂志. 2008(02)
[2]运动员前交叉韧带损伤的流行病学研究[J]. 敖英芳,田得祥,崔国庆,胡跃林,史和福,任玉衡. 体育科学. 2000(04)
本文编号：2923192
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