掺锶纳米羟基磷灰石对脂肪干细胞成骨效率影响的研究

发布时间：2020-12-18 21:02

　　目的:当今口腔颌面外科发展迅速,颌骨缺损已成为一个急需解决的难题。有证据表明锶不仅可以调控脂肪干细胞向成骨细胞分化,还可以加快骨基质蛋白的形成及沉淀。并促进骨基质蛋白的合成和沉淀。羟基磷灰石是当今临床上广泛应用的代骨材料,且已有大量研究报道了掺锶纳米磷灰石能够促进干细胞成骨分化。通过实验发现有着多向分化能力的脂肪干细胞,其离体培养具有较高的稳定增殖能力,且具有广泛的来源和较易的分离与培养的特点,是理想的种子细胞。故本实验以脂肪干细胞为基础细胞,探究掺锶纳米羟基磷灰石对脂肪干细胞成骨效率的影响。本实验通过比较三组不同培养条件下的ADSCs在不同时间节点的碱性磷酸酶活性;细胞增殖情况,明确时间条件对掺锶纳米羟基磷灰石调节脂肪干细胞成骨效率影响。实验方法:1、脂肪干细胞的分离、培养与鉴定;2、制备定浓度掺锶羟基磷灰石支架;3、材料与ASCs的复合形成ADSCs/Sr-HA支架为A组,并设置对照组:B组:成骨诱导培养液+ASCs/HA支架;C组:普通细胞培养液+ADSCs/HA支架;4、在不同时间结点对三组支架上的ADSCs进行细胞行为检测明确时间条件对掺锶纳米羟基磷灰石调节脂肪干细胞成骨分化... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：35 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小时ADSCs形态观察（倒置显微镜，200X）

图2 ADSCs分化能力的检测 成脂诱导14d后的油红O染色（光学显微镜，200X） ADSCs成骨诱导21天后经茜素红染色（光学显微镜，羟基磷灰石支架(Sr-HA)表征的大体观察如肉眼观为色白，表面触感略粗糙，压之变形能与冷冻过程中水的膨胀效应有关。Sr-HA支B

细胞内的融合的脂滴越多。14天后经油红O染色镜下观察，细胞内布满被染成橘红色圆形颗粒状的脂滴(图2A)；P3代ADSCs在成骨诱导下细胞核变圆、细胞体积变大，外基质中出现较多沉淀。21天后经茜素红染色后，镜下呈大小不一的红色钙化结节(图2B)；以上结果证明P3代的细胞具有分化成脂肪，成骨细胞的能力，提示其具有ADSCs的多向分化潜能。流式细胞仪检测结果显示：ADSCs表面标记物CD13，CD39表型表达阳性，造血干细胞CD34表型表达阴性。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2924606