生物人工肝用海藻酸钠/壳聚糖微囊的安全性和生物功能评价

发布时间：2020-12-19 19:27

　　目的:评价生物人工肝用海藻酸钠/壳聚糖微囊（AC微囊）的安全性和预期生物功能。方法:制备AC微囊,通过倒置电子显微镜、扫描电子显微镜（SEM）等对微囊的表面结构、密度、机械强度和物质通透性等进行综合表征;通过AC微囊的细胞毒性及溶血性能评价,考察其生物相容性;模拟其预期临床使用方式,用AC微囊包裹肝细胞,评价细胞的存活率和代谢活性:进一步考察微囊的预期生物功能。结果:SEM显示微囊表面具有微孔洞;微囊密度为（1.39±0.155）g·m L^-1;180 r·min^-1振摇24 h后其完整率在95%以上;微囊通透性试验显示10 min时人血清白蛋白释放率约为50%,90 min左右达到平衡状态。细胞毒性评价（MTT、LDH）的结果显示微囊浸提液与空白组相比细胞的相对活性没有显著性差异。血液相容性评价直接法显示溶血率为（1.36±0.211）%;浸提法的溶血率为（2.69±0.219）%,均低于标准限值（≤5%）。包裹的肝细胞均匀分布在微囊内,并且与未包裹的肝细胞相比其白蛋白和尿素合成量均有所提高。结论:本研究制备的AC微囊机械强度好,可允许小分... 

【文章来源】：药物分析杂志. 2016年01期 北大核心

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1实验材料
    1.1仪器
    1.2 材料和试剂
2 实验方法
    2.1 溶液的配制
        2.1.1 2.0% 海藻酸钠溶液
        2.1.2 0.5% 壳聚糖溶液
        2.1.3 微囊破囊液
        2.1.4 模拟体液（SBF）
    2.2 AC微囊的制备
    2.3 AC微囊的表征
        2.3.1表面形貌观察
        2.3.2 密度检测
        2.3.3 机械强度检测
        2.3.4 物质通透性检测
    2.4 AC微囊的体外生物相容性评价
        2.4.1体外细胞毒性评价
            2.4.1.1微囊浸提液的制备
            2.4.1.2MTT试验和LDH试验
        2.4.2 溶血试验
    2.5 微囊化肝细胞的活性和功能性评价
        2.5.1 微囊化Hep G2 细胞制备和培养
        2.5.2 微囊化肝细胞相对增殖率和活性评价
        2.5.3微囊化肝细胞代谢活性评价
        2.5.4微囊化肝细胞白蛋白合成能力评价
    2.6统计学处理
3结果
    3.1 AC微囊的表征
        3.1.1形貌表征
        3.1.2 微囊密度、机械强度和通透性
    3.2 微囊体外细胞毒性评价
    3.3 微囊体外溶血性能评价
    3.4微囊化细胞的细胞活性及代谢活性评价
        3.4.1微囊化Hep G2细胞活性评价
        3.4.2 微囊化Hep G2 细胞尿素合成能力检测
        3.4.3 微囊化Hep G2 细胞白蛋白合成量检测
4 讨论
5 小结


【参考文献】：
期刊论文
[1]海藻酸钠/壳聚糖微载体的制备及生物活性评价[J]. 李琳,刘宝林,韩宝三,唐临利.  应用化工. 2013(02)
[2]冻干法制备的海藻酸钙-壳聚糖组织工程复合材料支架[J]. 李沁华,王迪.  中国组织工程研究. 2012(29)
[3]可注射型海藻酸钙-壳聚糖复合材料的凝胶性能研究[J]. 王华明,曹阳,徐龙,卢凌彬.  材料导报. 2009(06)
[4]海藻酸盐基生物医用材料[J]. 顾其胜,朱彬.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(26)
[5]壳聚糖-海藻酸盐纳米粒子的制备及其对BSA的载药与释放特性[J]. 俞怡晨,姚炎庆,张亚琼,陆轶业,郭圣荣,范华骅.  功能高分子学报. 2005(04)
[6]Effect of artificial liver support system on patients with severe vira hepatitis:A study of four hundred cases[J]. Lan-Juan Li Qian Yang Jian-Rong Huang Xiao-Wei Xu Yue-Mei Chen Su-Zhen Fu Department of Infectious Diseases,First Hospital,College of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310003,Zhejiang Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(20)
[7]海藻酸钠-壳聚糖微囊成型机理及其对大分子药物的载药、释药研究[J]. 李沙,侯新朴.  药学学报. 2003(05)



本文编号：2926444