富血小板血浆复合胶原水凝胶诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化作用的研究
发布时间：2020-12-21 13:38
关节软骨缺损在临床中较为常见,因关节软骨缺乏神经血管分布、再生能力差,当关节软骨出现损伤后极难自我修复,因此软骨缺损的彻底治愈成为了临床治疗和基础研究的难点和热点。随着组织工程学和再生医学对软骨缺损研究的不断深入,为软骨缺损的修复提供了更为合适的治疗方案。本实验以兔的BMSCs作为软骨缺损修复的种子细胞,胶原水凝胶作为组织工程化软骨的支架材料,以自体富血小板血浆作为细胞的生长因子,三者共同构建组织工程软骨,观察其体内外成软骨和软骨修复的效果。第一部分PRP复合BMSCs/胶原水凝胶（COL）在体外成软骨诱导中的作用目的:PRP复合BMSCs/COL构建组织工程化软骨,观察PRP激活后释放的生长因子对组织工程化软骨中细胞增殖、分化及细胞外基质分泌的情况。方法:采用Ⅰ型胶制备胶原水凝胶,取三代间充质干细胞与胶原水凝胶混匀构建三维程组织,取兔外周血经二次离心提取富血小板血浆,并加入Ca Cl2激活。实验分组:BC组为胶原材料组,第三代BMSCs与COL构建组织工程化软骨;BCT组为第三代BMSCs与COL构建组织工程化软骨,添加含有TGF-β的软骨诱导液进行培养;BCP组为第三代BMSCs与...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNA标准曲线
BC 组，BCP 组进行培养 7,、14、21 天后检测细胞增殖情况。（*P＜0.05，**P***P＜0.001）ure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of cu(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001) HE 染色组织工程化软骨行 HE 染色结果如图 1.3 所示，BC 组，BCT 组与 B观察到典型的软骨细胞形态，软骨细胞呈现圆形或者椭圆型，同到典型的软骨陷窝样结构，接近软骨细胞的特征形态。BCP 组、B骨样细胞数量优于 BC 组，BCP 组细胞质明显增多。
图 1-2 B 组，BC 组，BCP 组进行培养 7,、14、21 天后检测细胞增殖情况。（*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001）Figure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of culture.(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001)3.2 HE 染色组织工程化软骨行 HE 染色结果如图 1.3 所示，BC 组，BCT 组与 BCP 组均能观察到典型的软骨细胞形态，软骨细胞呈现圆形或者椭圆型，同时能够见到典型的软骨陷窝样结构，接近软骨细胞的特征形态。BCP 组、BCT 组的软骨样细胞数量优于 BC 组，BCP 组细胞质明显增多。
【参考文献】：
期刊论文
[1]含精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰环两亲性肽自组装凝胶与骨髓间充质干细胞相容性研究[J]. 肖仁顺,阮宏,蒋星海,吴凯,王晓梅,宋玉林. 重庆医学. 2017(35)
[2]单一生物材料聚乳酸/羟基乙酸共聚物构建组织工程骨软骨的可行性[J]. 段平国,郭润生,余兴元,潘震,李晓峰,李虎,刘俊,姚浩群. 中国组织工程研究. 2017(34)
[3]软骨细胞及骨髓间充质干细胞共培养修复关节软骨缺损[J]. 陈刚,钱明权,杜炜. 中国组织工程研究. 2017(32)
[4]使用透明质酸钠复合海藻酸钠水凝胶球3D培养软骨细胞抑制细胞去分化的研究[J]. 刘鑫成,孟星星,祝瑞,张煜珅,成西侠,范宏斌. 现代生物医学进展. 2017(16)
[5]组织工程支架材料性质对干细胞分化的影响[J]. 郑力恒,吴昊,尚玉攀,张嘉晴. 中国组织工程研究. 2017(14)
[6]构建组织工程软骨支架材料:现状及未来[J]. 周勇,朱伟民,彭亮权,王大明,刘威,徐晓,王大平. 中国组织工程研究. 2017(10)
[7]实验兔骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定[J]. 马笃军,彭力平,王立新,余阗,裴军宇,李明华,徐宁达,肖伟. 基因组学与应用生物学. 2017(01)
[8]富血小板血浆在骨关节外科研究及应用的进展[J]. 黄宇阳,姚咏嫦. 中华关节外科杂志(电子版). 2016(05)
[9]富血小板血浆治疗骨关节炎的研究进展[J]. 周祝兴,邱冰. 贵州医药. 2016(04)
[10]骨髓间充质干细胞与壳聚糖复合修复关节软骨损伤[J]. 陈路,夏先学,蒋科. 中国组织工程研究. 2015(45)
博士论文
[1]MicroRNA在胚胎干细胞分化过程中作用机制研究[D]. 姚南.北京协和医学院 2014
[2]定向结构软骨支架复合骨髓基质干细胞修复兔关节软骨缺损的研究[D]. 贾帅军.第四军医大学 2012
硕士论文
[1]仿贻贝明胶基双层水凝胶的性能及其用于骨/软骨修复的研究[D]. 王志雄.西南交通大学 2017
[2]壳聚糖/改性纳米羟基磷灰石复合水凝胶的制备及其软骨缺损修复有效性评价[D]. 杨慎宇.暨南大学 2016
[3]组织工程骨软骨修复兔膝关节全层软骨缺损的实验研究[D]. 徐步强.河北北方学院 2014
本文编号：2929920
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNA标准曲线
BC 组，BCP 组进行培养 7,、14、21 天后检测细胞增殖情况。（*P＜0.05，**P***P＜0.001）ure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of cu(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001) HE 染色组织工程化软骨行 HE 染色结果如图 1.3 所示，BC 组，BCT 组与 B观察到典型的软骨细胞形态，软骨细胞呈现圆形或者椭圆型，同到典型的软骨陷窝样结构，接近软骨细胞的特征形态。BCP 组、B骨样细胞数量优于 BC 组，BCP 组细胞质明显增多。
图 1-2 B 组，BC 组，BCP 组进行培养 7,、14、21 天后检测细胞增殖情况。（*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001）Figure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of culture.(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001)3.2 HE 染色组织工程化软骨行 HE 染色结果如图 1.3 所示，BC 组，BCT 组与 BCP 组均能观察到典型的软骨细胞形态，软骨细胞呈现圆形或者椭圆型，同时能够见到典型的软骨陷窝样结构，接近软骨细胞的特征形态。BCP 组、BCT 组的软骨样细胞数量优于 BC 组，BCP 组细胞质明显增多。
【参考文献】：
期刊论文
[1]含精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰环两亲性肽自组装凝胶与骨髓间充质干细胞相容性研究[J]. 肖仁顺,阮宏,蒋星海,吴凯,王晓梅,宋玉林. 重庆医学. 2017(35)
[2]单一生物材料聚乳酸/羟基乙酸共聚物构建组织工程骨软骨的可行性[J]. 段平国,郭润生,余兴元,潘震,李晓峰,李虎,刘俊,姚浩群. 中国组织工程研究. 2017(34)
[3]软骨细胞及骨髓间充质干细胞共培养修复关节软骨缺损[J]. 陈刚,钱明权,杜炜. 中国组织工程研究. 2017(32)
[4]使用透明质酸钠复合海藻酸钠水凝胶球3D培养软骨细胞抑制细胞去分化的研究[J]. 刘鑫成,孟星星,祝瑞,张煜珅,成西侠,范宏斌. 现代生物医学进展. 2017(16)
[5]组织工程支架材料性质对干细胞分化的影响[J]. 郑力恒,吴昊,尚玉攀,张嘉晴. 中国组织工程研究. 2017(14)
[6]构建组织工程软骨支架材料:现状及未来[J]. 周勇,朱伟民,彭亮权,王大明,刘威,徐晓,王大平. 中国组织工程研究. 2017(10)
[7]实验兔骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定[J]. 马笃军,彭力平,王立新,余阗,裴军宇,李明华,徐宁达,肖伟. 基因组学与应用生物学. 2017(01)
[8]富血小板血浆在骨关节外科研究及应用的进展[J]. 黄宇阳,姚咏嫦. 中华关节外科杂志(电子版). 2016(05)
[9]富血小板血浆治疗骨关节炎的研究进展[J]. 周祝兴,邱冰. 贵州医药. 2016(04)
[10]骨髓间充质干细胞与壳聚糖复合修复关节软骨损伤[J]. 陈路,夏先学,蒋科. 中国组织工程研究. 2015(45)
博士论文
[1]MicroRNA在胚胎干细胞分化过程中作用机制研究[D]. 姚南.北京协和医学院 2014
[2]定向结构软骨支架复合骨髓基质干细胞修复兔关节软骨缺损的研究[D]. 贾帅军.第四军医大学 2012
硕士论文
[1]仿贻贝明胶基双层水凝胶的性能及其用于骨/软骨修复的研究[D]. 王志雄.西南交通大学 2017
[2]壳聚糖/改性纳米羟基磷灰石复合水凝胶的制备及其软骨缺损修复有效性评价[D]. 杨慎宇.暨南大学 2016
[3]组织工程骨软骨修复兔膝关节全层软骨缺损的实验研究[D]. 徐步强.河北北方学院 2014
本文编号：2929920
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