无标记磁性氧化石墨烯二维复合材料对CTCs的高效捕获与毒性评价
发布时间：2020-12-24 11:13
癌症是全世界都在关注的致死性疾病,而转移被认为是造成癌症死亡最主要的原因。在转移过程中,肿瘤细胞从原发肿瘤脱离,进入血液并同血液循环行进入到人体的不同组织。外周血中的这些从原位“脱离”的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞（CTCs）。生物学家认为CTCs是造成原发肿瘤向远端转移的主要原因,也是理解转移生物学问题的关键。作为“实时液体活检”的CTCs分析技术对肿瘤早期诊断、愈后复发检测、治疗效应评估、抗癌药物筛选及治疗靶点的选择等方面具有很大的临床价值。而对血液中数目极其稀有的CTCs的有效分离操作是CTCs的检测过程中具有挑战性的重要环节。而在对CTCs的分离操作中除了要考虑对上亿血细胞中稀有的CTCs进行有效分离外,还需考虑大量血细胞的背景干扰带来对捕获纯度的影响以及在捕获分离过程中对细胞的活性影响,因为这些因素会影响对CTCs捕获分离后下游的分子分析及扩增培养。目前建立在CTCs与血液正常细胞的物理特性及表面标志物的差异基础之上的分离操作都存在一定的局限性而不能应用于临床检测。与正常血液细胞不同的糖代谢方式造成肿瘤细胞膜强负电性的广谱性标识或许可以为CTCs的有效分离提供新的解决方案。本课题...
【文章来源】：西北大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语对照表
第一章 绪论
1.1 研究背景
1.1.1 循环肿瘤细胞（CTCs）分离技术的研究意义
1.1.2 CTCs常见的分离技术及存在问题
1.1.3 氧化石墨烯及其磁性复合物在CTCs捕获领域的应用研究
1.1.4 CTCs捕获分离面临的问题总结
1.2 研究目的与意义
1.3 论文研究内容及技术路线
1.4 本文创新点
第二章 材料的制备及表征
2.1 材料与设备
2.1.1 试剂
2.1.2 仪器与设备
2.2 材料合成方法
2.2.1 超顺磁四氧化三铁纳米颗粒的制备（IO-PAA）
2）"> 2.2.2 荧光磁性纳米颗粒的制备（RBITC-IO@SiO2）
2.2.3 超顺磁纳米颗粒表面羧基化修饰（IO-COOH）
2.2.4 超顺磁纳米颗粒的表面正电修饰（IO-PEI）
3O4@GO的可控制备"> 2.2.5 2D磁性氧化石墨烯复合材料Fe3O4@GO的可控制备
2.3 磁性材料浓度测定方法
2.4 0D与2D磁性材料的表征与分析
2.5 结果与分析
2.5.1 材料粒径、电位表征与分析
2.5.2 磁性材料的形貌表征与分析
2.5.3 磁性材料的浓度确定（以含Fe量为准）
2.5.4 纳米材料荧光性能表征与分析
2.5.5 磁性材料磁性能的表征与分析
2.6 本章小结
第三章 材料对细胞的捕获及毒性评价
3.1 材料与设备
3.1.1 试剂与耗材
3.1.2 仪器与设备
3.2 实验方法与仪器
3.2.1 细胞培养方法
3.2.2 磁性材料对大量癌细胞的捕获
3.2.3 磁性材料对白细胞的捕获
3.2.4 在模拟血样中捕获稀有GFP细胞
3.2.5 荧光显微分析方法
3.2.6 激光共聚焦分析方法
3.2.7 扫描电镜分析方法
3.2.8 细胞切片透射电子显微分析
3.2.9 CCK-8试剂盒检测细胞毒性
3.2.10 LDH试剂盒检测细胞毒性
3.2.11 贴壁细胞瑞氏染色
3.2.12 悬浮细胞瑞氏染色
3.3 结果与分析
3.3.1 正、负电荧光磁性材料与癌细胞的结合能力分析
3.3.2 磁性材料对大量癌细胞的捕获分析
3.3.3 正电磁性材料对白细胞的捕获分析
3.3.4 正电磁性材料对模拟血样中GFP细胞的捕获分析
3.3.5 由正电介导的正电磁性材料与细胞结合—SEM形貌分析
3.3.6 材料的毒理性分析
3.3.7 细胞与材料的相互作用—细胞切片TEM分析
3.3.8 0D和2D正电磁性材料对细胞形态的影响
3.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士期间取得的学术成果
致谢
本文编号：2935556
【文章来源】：西北大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语对照表
第一章 绪论
1.1 研究背景
1.1.1 循环肿瘤细胞（CTCs）分离技术的研究意义
1.1.2 CTCs常见的分离技术及存在问题
1.1.3 氧化石墨烯及其磁性复合物在CTCs捕获领域的应用研究
1.1.4 CTCs捕获分离面临的问题总结
1.2 研究目的与意义
1.3 论文研究内容及技术路线
1.4 本文创新点
第二章 材料的制备及表征
2.1 材料与设备
2.1.1 试剂
2.1.2 仪器与设备
2.2 材料合成方法
2.2.1 超顺磁四氧化三铁纳米颗粒的制备（IO-PAA）
2）"> 2.2.2 荧光磁性纳米颗粒的制备（RBITC-IO@SiO2）
2.2.3 超顺磁纳米颗粒表面羧基化修饰（IO-COOH）
2.2.4 超顺磁纳米颗粒的表面正电修饰（IO-PEI）
3O4@GO的可控制备"> 2.2.5 2D磁性氧化石墨烯复合材料Fe3O4@GO的可控制备
2.3 磁性材料浓度测定方法
2.4 0D与2D磁性材料的表征与分析
2.5 结果与分析
2.5.1 材料粒径、电位表征与分析
2.5.2 磁性材料的形貌表征与分析
2.5.3 磁性材料的浓度确定（以含Fe量为准）
2.5.4 纳米材料荧光性能表征与分析
2.5.5 磁性材料磁性能的表征与分析
2.6 本章小结
第三章 材料对细胞的捕获及毒性评价
3.1 材料与设备
3.1.1 试剂与耗材
3.1.2 仪器与设备
3.2 实验方法与仪器
3.2.1 细胞培养方法
3.2.2 磁性材料对大量癌细胞的捕获
3.2.3 磁性材料对白细胞的捕获
3.2.4 在模拟血样中捕获稀有GFP细胞
3.2.5 荧光显微分析方法
3.2.6 激光共聚焦分析方法
3.2.7 扫描电镜分析方法
3.2.8 细胞切片透射电子显微分析
3.2.9 CCK-8试剂盒检测细胞毒性
3.2.10 LDH试剂盒检测细胞毒性
3.2.11 贴壁细胞瑞氏染色
3.2.12 悬浮细胞瑞氏染色
3.3 结果与分析
3.3.1 正、负电荧光磁性材料与癌细胞的结合能力分析
3.3.2 磁性材料对大量癌细胞的捕获分析
3.3.3 正电磁性材料对白细胞的捕获分析
3.3.4 正电磁性材料对模拟血样中GFP细胞的捕获分析
3.3.5 由正电介导的正电磁性材料与细胞结合—SEM形貌分析
3.3.6 材料的毒理性分析
3.3.7 细胞与材料的相互作用—细胞切片TEM分析
3.3.8 0D和2D正电磁性材料对细胞形态的影响
3.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士期间取得的学术成果
致谢
本文编号：2935556
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