改良的羟基磷灰石纳米载体性能及其体外基因转染研究

发布时间：2017-04-09 10:17

  本文关键词：改良的羟基磷灰石纳米载体性能及其体外基因转染研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的测试课题组改良的纳米基因载体的理化参数,并观察其体外基因转染的性能。 方法通过化学共沉淀-水热合成法合成羟基磷灰石纳米颗粒,用PEI做表面修饰以提高羟基磷灰石纳米载体的DNA结合能力和转染效率,并应用穿透肽进一步提高其基因转染率。通过透射电镜观察纳米颗粒的形态和粒径、测定修饰前后的纳米羟基磷灰石在室温的悬浮稳定性、与DNA的结合和保护能力及体外细胞转染能力. 结果1)制备改良的羟基磷灰石纳米颗粒,有较高的DNA结合力(与DNA结合的质量比为50：1)。2)经PEI修饰后的nHAP具有更好的悬浮稳定性、DNA结合力更高(与DNA结合的质量比为12.5：1),体外细胞转染率由原来的1.83%提升至8.14%。3)通过穿透肽进一步将转染效率提升至10.12%。 结论1)经PEI修饰的羟基纳米磷灰石载体的悬浮稳定性和DNA结合能力都要优于单纯羟基纳米磷灰石颗粒。2)结合穿透肽后,可进一步提高PEI修饰的羟基磷灰石纳米载体的体外转染效率。(图28幅,表3个,参考文献52篇)
【关键词】：纳米羟基磷灰石 聚乙烯亚胺 化学共沉淀-水热合成法 基因载体 基因转染率 穿透肽
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 资助本课题的科研基金4-5
• 摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 目录8-9
• 符号说明9-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 实验部分13-23
• 2.1 实验试剂13-14
• 2.2 实验仪器及设备14
• 2.3 实验所需培养基及试剂14-15
• 2.4 其他15
• 2.5 实验方法及步骤15-23
• 2.5.1 pEGFP-N1/pEGFP-N1-NT3质粒的获取15-18
• 2.5.2 nHAP/PEI-nHAP的制备18
• 2.5.3 nHAP/PEI-nHAP的性能研究18-21
• 2.5.4 细胞转染21-23
• 第三章 实验结果23-31
• 3.1 nHAP及PEI-nHAP的性能研究23-31
• 3.1.1 nHAP及PEI-nHAP的电镜表征23
• 3.1.2 nHAP、PEI-nHAP的悬浮稳定性23-25
• 3.1.3 保存质粒的测序25-26
• 3.1.4 nHAP/PEI-nHAP与质粒DNA的结合试验26-27
• 3.1.5 MTT实验27-29
• 3.1.6 转染结果29-31
• 第四章 讨论31-34
• 4.1 羟基碑灰石纳米的合成31
• 4.2 羟基碑灰石纳米的理化性质31-33
• 4.3 基因转染及效率提氋33-34
• 第五章 结论34-35
• 参考文献35-38
• 综述38-46
• 参考文献43-46
• 致谢46-47

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄容琴,裴元英;基因治疗中非病毒载体的研究进展[J];国外医学.药学分册;2005年02期

2 王凤华;刘俊;唐冬英;薛昌刚;童春义;吴宪远;刘选明;;基于壳聚糖纳米颗粒的基因枪法转化洋葱细胞研究[J];湖南大学学报(自然科学版);2009年05期

3 余红伟;王源升;李瑜;蒋健晖;吴海龙;魏_

本文编号：295033