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RANKL/RANK/OPG系统在感染松动假体周围骨溶解中的作用

发布时间:2021-01-17 09:36
  RANKL/RANK/OPG系统的失衡已被大量文献证实与THA术后无菌性松动引起的假体周围骨溶解密切相关,但感染松动引起的假体周围骨溶解其发病机制则鲜见报道。本研究拟通过检测RANKL/RANK/OPG信号通路在体外细胞和界膜组织中的表达情况,探讨RANKL/RANK/OPG系统是否与感染松动引起假体周围骨溶解的发病相关。第一章RANK在巨噬细胞中的表达目的:探讨凝血酶和UHMWPE颗粒处理后巨噬细胞中RANK mRNA的表达差异。方法:用佛波酯将U937单核细胞诱导为巨噬细胞,通过细胞形态学观察、免疫学标志检查及体外吞噬功能检测等方法鉴定是否成功。将UHMWPE颗粒用球磨机研磨后进行其直径、性质和内毒素含量检测。将诱导成功的巨噬细胞分别与凝血酶和制备好的UHMWPE颗粒共同培养,MTT法检测凝血酶和UHMWPE颗粒对巨噬细胞的最佳浓度。将巨噬细胞分为细胞+凝血酶组、细胞+UHMWPE颗粒组和单纯细胞组(对照组),实时荧光定量PCR技术检测RANK mRNA在三种巨噬细胞中的表达差异。结果:U937单核细胞经佛波酯处理后能成功被诱导为巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征、表达特异的分化抗原... 

【文章来源】:中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:104 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

RANKL/RANK/OPG系统在感染松动假体周围骨溶解中的作用


不同浓度的UHMWPE颗粒对巨嘆细

凝血酶,细胞活性,细胞,细胞存活率


MTT法测得各实验组与对照组的细胞存活率(%)见表1-1、表1-2及图1-7、图1-8。统计学分析发现,Img/ml UHMWPE颗粒组巨唾细胞存活率最低(PcO.Ol),其他两个实验组间比较差异无统计学意义(P〉0.05) ; 50U/ml凝血酶细胞存活率最高(P<0.05)。因此,本研究在随后的实验中选择0.1 mg/mlUHMWPE颗粒和50 U/ml凝血酶与巨睡细胞共培养。表1-1不同浓度的UHMWPE颗粒对巨唆细胞细胞活性的影响(i±s)组别 细胞存活率(%)对照组 100O.Olmg/ml UHMWPE 85.60±7.920.1 mg/ml UHMWPE 89.22±7.281 mg/ml UHMWPE 62.04士4.20表1-1不同农度的凝血酶对巨银细胞细胞活性的影响(x± S)组别 细胞存活率(%)对照组 10010 U/ml 凝血酶 121.12±3.7150 U/ml 凝血酶 127.52±4.02100 u/ml 凝血酶 84.68±3.4015

表达差异,凝血酶,处理组,表达水平


基因的Ct值,用法进行换算后进行统计学分析,得到目的基因的相对表达量(RQ值),结果如图1-9及表1-3。经UHMWPE颗粒处理后的巨噬细胞,其RANK mRNA表达水平RQ值(5.46±1.28 )明显高于凝血酶处理组(1.69±0.40)和对照组(单纯细胞组)(0.11±0.03),P<0.01o同时凝血酶处理组RANK mRNA表达水平也明显高于对照组(PO.Ol),表明经凝血酶、颗粒处理后巨唾细胞中RANK mRNA特异性高表达,特别是经UHMWPE颗粒处理后的巨隨细胞。表1-3经不同处理后巨嗟细胞中RANK mRNA的表达水平组别 RANK mRNA的RQ值凝血酶处理组 1.69±0.40颗粒处理组 5.46±1.28对照组 0.11±0.0316

【参考文献】:
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本文编号:2982621

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