利用猪冠状动脉脱细胞基质和PLCL/明胶纺丝构建双层小口径人工血管的研究
发布时间：2021-01-28 17:46
心血管疾病（Coronary artery disease,CAD）是目前世界上发病率、致死率最高的疾病之一。随着患病人数的增加,人工血管移植需求量也逐年增加。在大多数情况下用于置换受损血管的有自体血管,同种异体血管以及合成的聚合物血管。由于年龄、疾病以及其他一些并发症,自体血管数量十分有限,尽管它是目前临床移植的金标准。合成血管在大口径血管已经在临床上取得了很好的应用,但小口径血管（直径<6 mm）却极易由于急性血栓、内膜增生等原因导致移植失败。因此寻找一种可用于临床的小口径人工血管非常重要。作为天然材料或其他合成材料的替代物,脱细胞基质近年来备受关注。脱细胞血管保留了胞外基质,主要为胶原和弹性纤维,这些物质在哺乳动物中有很高的同源性,种属差异小。这类血管由于源于天然血管,所以具有很好的顺应性和细胞相容性,能够促进细胞的黏附、铺展、增殖和分化,完成移植血管的再内皮化。但是天然血管在经过脱细胞处理后,内皮细胞被去除,内膜下暴露的胶原可以激活凝血系统,因而如果将脱细胞血管直接用作替代材料植入体内,易引发血栓,而且经脱细胞处理后血管力学性能降低、弹力蛋白的降解加速等,从而导致动脉瘤的...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
静电纺丝装置示意图
图 1.3 同轴静电纺丝装置Fig.1.3 Coaxial electrostatic spinning device.电纺丝传统的用用有机溶剂溶解聚合物材料之外，Hae[56]等人还利用静电纺丝，以避免有机溶剂对细胞、组织及生物带来的不良影方法也能获得良好的纤维结构。此外，研究者们不满足于非生，Wagner[57]等人还将平滑肌细胞以静电喷雾方式和静电纺丝相的人工血管。电纺丝血管的应用者们利用静电纺丝制备了 PCL、 PLCL、 PGA、 胶原、明胶、或者复合材料的双层或者多层的小口径人工血管且被用于各种同部位。Sarra de Valencea[58]等人制备的 PCL 材质支架，并成功动脉，研究了 PCL 支架在大鼠体内的性能变化。Young[59]等人原的浓度，聚合物溶液流速以及针头大小制备了内层致密外层
900 ml 去离子水中，利用浓盐酸调整 pH 至 3，定容至 1 L，室温避光保存 1 个月。2.2.9 统计学方法实验所得数据采用 Graphpad prism 6.0 做统计学分析，利用 T 检验分析各组间是否存在显著性差异，p<0.05 为差异显著，p<0.01 为差异极显著。2.3 实验结果2.3.1 脱细胞支架的染色结果天然血管在经 HE 染色后呈现两层不同的结构，内层结构致密，细胞排列紧凑；外层结构疏松，只有少量的细胞存在。经脱细胞处理后，内外两层分界更为明显，无肉眼可见的细胞核（图 2.1）。胶原表现成蓝色，细胞质、肌纤维和红细胞则呈红色，细胞核呈蓝褐色。天然血管经马松染色后可观察到细胞质纤维在内层紧密且有序的排列，外层胶原组织较为松散。经脱细胞处理后，血管只保留胶原成分，无可见的胞质纤维，内层变得疏松无序且出现少量孔隙，外层破坏严重，孔隙变大无完整结构（图 2.2）。间二苯酚染色表明经脱细胞处理后血管内层弹力板排列疏松（图 2.3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小口径电纺组织工程血管支架的研究进展[J]. 杨锦秀,何乐人. 组织工程与重建外科杂志. 2016(03)
[2]去细胞化支架材料肝素化修饰及抗凝性能研究[J]. 包骥,孙赳,周永杰,吴琼,王宇嘉,李丽,姜鑫,马朗,谢明均,石毓君,步宏. 生物医学工程学杂志. 2015(03)
[3]小口径组织工程血管基质材料的生物学和力学评价[J]. 谭菊,曾文,周静婷,李刚,张晓彦,朱楚洪. 局解手术学杂志. 2014(01)
[4]以肝素固化脱细胞支架构建的小口径抗凝人工血管[J]. 周敏,刘长建,卫志庆,乔威,乔彤,冉峰,张明. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(36)
[5]PGE1对血小板的体外激活抑制作用[J]. 周俊,刘景汉,邢颜超,王冬梅. 临床输血与检验. 2007(02)
[6]1,9-二甲基亚甲基蓝光度法测定海参糖胺聚糖[J]. 刘义,钱和. 分析试验室. 2005(06)
[7]脱细胞基质与血管内皮细胞体外相容性的研究[J]. 郭铁芳,杨大平,韩雪峰,杜金荣,张颖. 中国修复重建外科杂志. 2003(02)
博士论文
[1]高抗凝、可诱导再生小口径人工血管的研究[D]. 魏屹晗.天津医科大学 2010
硕士论文
[1]明胶-PLCL共纺可降解小口径人工血管的研究[D]. 吴海德.重庆大学 2017
[2]SF/PLGA共混静电纺丝人工血管材料的研究[D]. 戴有刚.苏州大学 2009
本文编号：3005411
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
静电纺丝装置示意图
图 1.3 同轴静电纺丝装置Fig.1.3 Coaxial electrostatic spinning device.电纺丝传统的用用有机溶剂溶解聚合物材料之外，Hae[56]等人还利用静电纺丝，以避免有机溶剂对细胞、组织及生物带来的不良影方法也能获得良好的纤维结构。此外，研究者们不满足于非生，Wagner[57]等人还将平滑肌细胞以静电喷雾方式和静电纺丝相的人工血管。电纺丝血管的应用者们利用静电纺丝制备了 PCL、 PLCL、 PGA、 胶原、明胶、或者复合材料的双层或者多层的小口径人工血管且被用于各种同部位。Sarra de Valencea[58]等人制备的 PCL 材质支架，并成功动脉，研究了 PCL 支架在大鼠体内的性能变化。Young[59]等人原的浓度，聚合物溶液流速以及针头大小制备了内层致密外层
900 ml 去离子水中，利用浓盐酸调整 pH 至 3，定容至 1 L，室温避光保存 1 个月。2.2.9 统计学方法实验所得数据采用 Graphpad prism 6.0 做统计学分析，利用 T 检验分析各组间是否存在显著性差异，p<0.05 为差异显著，p<0.01 为差异极显著。2.3 实验结果2.3.1 脱细胞支架的染色结果天然血管在经 HE 染色后呈现两层不同的结构，内层结构致密，细胞排列紧凑；外层结构疏松，只有少量的细胞存在。经脱细胞处理后，内外两层分界更为明显，无肉眼可见的细胞核（图 2.1）。胶原表现成蓝色，细胞质、肌纤维和红细胞则呈红色，细胞核呈蓝褐色。天然血管经马松染色后可观察到细胞质纤维在内层紧密且有序的排列，外层胶原组织较为松散。经脱细胞处理后，血管只保留胶原成分，无可见的胞质纤维，内层变得疏松无序且出现少量孔隙，外层破坏严重，孔隙变大无完整结构（图 2.2）。间二苯酚染色表明经脱细胞处理后血管内层弹力板排列疏松（图 2.3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小口径电纺组织工程血管支架的研究进展[J]. 杨锦秀,何乐人. 组织工程与重建外科杂志. 2016(03)
[2]去细胞化支架材料肝素化修饰及抗凝性能研究[J]. 包骥,孙赳,周永杰,吴琼,王宇嘉,李丽,姜鑫,马朗,谢明均,石毓君,步宏. 生物医学工程学杂志. 2015(03)
[3]小口径组织工程血管基质材料的生物学和力学评价[J]. 谭菊,曾文,周静婷,李刚,张晓彦,朱楚洪. 局解手术学杂志. 2014(01)
[4]以肝素固化脱细胞支架构建的小口径抗凝人工血管[J]. 周敏,刘长建,卫志庆,乔威,乔彤,冉峰,张明. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(36)
[5]PGE1对血小板的体外激活抑制作用[J]. 周俊,刘景汉,邢颜超,王冬梅. 临床输血与检验. 2007(02)
[6]1,9-二甲基亚甲基蓝光度法测定海参糖胺聚糖[J]. 刘义,钱和. 分析试验室. 2005(06)
[7]脱细胞基质与血管内皮细胞体外相容性的研究[J]. 郭铁芳,杨大平,韩雪峰,杜金荣,张颖. 中国修复重建外科杂志. 2003(02)
博士论文
[1]高抗凝、可诱导再生小口径人工血管的研究[D]. 魏屹晗.天津医科大学 2010
硕士论文
[1]明胶-PLCL共纺可降解小口径人工血管的研究[D]. 吴海德.重庆大学 2017
[2]SF/PLGA共混静电纺丝人工血管材料的研究[D]. 戴有刚.苏州大学 2009
本文编号：3005411
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