纳米氧化镧对小鼠原代成骨细胞增殖的影响机制

发布时间：2017-04-17 20:10

  本文关键词：纳米氧化镧对小鼠原代成骨细胞增殖的影响机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本文以两种形貌的纳米氧化镧作为研究对象,对其理化性质进行了表征,以小鼠原代成骨细胞为模型,通过四甲基噻唑蓝法(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性检测、流式细胞术等检测方法,研究了不同形貌的纳米氧化镧对原代成骨细胞的活性、活性氧水平,线粒体膜电位等的影响。此外,研究了两种形貌的氧化镧对两种生物体内含量较多的蛋白牛血清白蛋白(BSA)和牛纤维蛋白原(BFG)结构的影响及吸附蛋白前后纳米材料生物效应的改变。结论如:1.两种形貌的氧化镧纳米颗粒可以抑制成骨细胞的增殖,抑制效果具有时间和剂量依赖性,同剂量下片状纳米氧化镧的对细胞的抑制效应比棒状氧化镧要高。氧化镧纳米颗粒可以引起细胞内活性氧水平上升,线粒体膜电位降低,促使细胞凋亡,从而抑制成骨细胞的增殖。2.孵育蛋白后的氧化镧纳米颗粒,其抑制细胞增殖的效果,以及对细胞内活性氧水平、线粒体膜电位及细胞凋亡比例的影响比未孵育蛋白的纳米氧化镧颗粒要低。3.蛋白质改变了纳米氧化镧的表面电荷,BSA对材料表面电荷的影响要低于BFG的影响。纳米氧化镧与蛋白作用后,蛋白的荧光发生猝灭,这种效应具有剂量和时间依赖性,片状纳米氧化镧对蛋白质荧光猝灭的影响较棒状氧化镧更为明显。4.纳米氧化镧与蛋白作用后会改变蛋白质的二级结构,二级结构中α-螺旋和β-折叠比例随纳米材料作用而有所变化。片状纳米氧化镧对蛋白质二级结构的影响要高于棒状纳米氧化镧。
【关键词】：纳米氧化镧 成骨细胞 蛋白质结构
【学位授予单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R318.08;TQ133.3
【目录】：

• 中文摘要5-6
• abstract6-9
• 第1章 绪论9-17
• 1.1 稀土纳米材料9-11
• 1.1.1 稀土纳米材料9-10
• 1.1.2 稀土纳米材料在生物学领域的应用10-11
• 1.2 纳米材料对成骨细胞的生物效应11-12
• 1.3 蛋白对纳米材料生物效应的影响12-15
• 1.4 立题依据15-17
• 1.4.1 立题依据15-16
• 1.4.2 研究内容16-17
• 第2章 纳米氧化镧抑制成骨细胞增殖的机制17-35
• 2.1 实验材料17-18
• 2.1.1 实验试剂17
• 2.1.2 实验仪器17-18
• 2.2 实验方法18-22
• 2.2.1 X射线衍射18-19
• 2.2.2 扫描电子显微镜19
• 2.2.3 培养基中粒径分布19
• 2.2.4 原代成骨细胞的分离培养19-20
• 2.2.5 材料的摄取及摄取机制20
• 2.2.6 细胞活性检测20-21
• 2.2.7 乳酸脱氢酶检测21
• 2.2.8 活性氧水平检测21-22
• 2.2.9 线粒体膜电位变化22
• 2.2.10 细胞凋亡检测22
• 2.3 结果与讨论22-31
• 2.3.1 纳米材料表征结果22-24
• 2.3.2 细胞对材料的摄取及摄取机制24-25
• 2.3.3 细胞活性检测25-27
• 2.3.4 LDH检测27-28
• 2.3.5 细胞内活性氧含量28-29
• 2.3.6 线粒体膜电位的改变29-31
• 2.3.7 细胞凋亡31
• 2.4 总结31-35
• 第3章 纳米氧化镧对蛋白二级结构的影响35-47
• 3.1 实验材料35-36
• 3.1.1 实验试剂35
• 3.1.2 实验仪器35-36
• 3.2 实验方法36-38
• 3.2.1 Zeta电位分析36-37
• 3.2.2 结合蛋白总量分析37
• 3.2.3 稳态荧光光谱分析37
• 3.2.4 圆二色谱分析37-38
• 3.3 结果与讨论38-45
• 3.3.1 zeta电位的改变38
• 3.3.2 结合蛋白总量分析38-40
• 3.3.3 稳态荧光光谱分析40-42
• 3.3.4 圆二色谱分析42-45
• 3.4 总结45-47
• 第4章 全文总结47-48
• 参考文献48-58
• 致谢58-59
• 攻读硕士期间取得的科研成果59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 邹雪艳;褚留杰;董烁;赵彦保;李宾杰;;生物功能化纳米SiO_2微球的构建及对谷胱甘肽S-转移酶的捕获分离[J];高等学校化学学报;2012年07期

2 景欢旺;王小梅;刘永;王安琪;;磁性纳米复合氧化物固体酸催化剂的制备及酯化性能[J];催化学报;2015年02期

3 赵玲子;滕洪辉;郭静;孙悦;;TiO_2纳米管对牛血清白蛋白作用的光谱学研究[J];辽宁化工;2012年05期

4 黄天天;付雁;张金利;李椺;;蛋白功能化磁性纳米颗粒的制备及应用[J];化学进展;2012年08期

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本文编号：314215