钛离子对T细胞内钙离子浓度影响的研究

发布时间：2017-04-20 07:19

  本文关键词：钛离子对T细胞内钙离子浓度影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察钛离子对T细胞内钙离子浓度和分布变化,三磷酸肌醇(IP3)的表达和磷脂酶Cγ1 (PLCγ1)表达及其磷酸化水平的影响,探讨钛离子对T细胞内钙离子浓度及钙通道上IP3、PLCγ1蛋白的影响。方法：1、培养JukatT细胞,MTT比色法检测钛离子使T细胞增殖率为50%、95%的浓度,并选择最大增殖率的浓度和中间的离子浓度,作为实验组浓度。2、将Juka T细胞用植物血凝素(PHA)预先活化或不活化,然后与不同浓度的钛离子共培养,激光共聚焦显微镜检测T细胞在24小时胞内钙离子含量和分布变化表达,酶联免疫吸附剂测定CELLSA)检测24小时IP3蛋白表达量,蛋白免疫印迹法(WB)检测24小时细胞内PLC]1蛋白表达水平及其磷酸化水平。结果：1、钛离子浓度低于100μM/L时,可活化增殖T细胞,随浓度增加,增殖率上升；浓度在100-200μM/L之间时,增殖率下降,浓度大于200pM/L时,细胞呈抑制增殖。细胞的增殖率为50%、95%的浓度分别是5μM/L、10μM/L,最大增殖率时浓度为100gM/L,中间浓度为50μM/L。2、浓度为5μM/L,10μM/L,50μM/L, 100μM/L的钛离子,在含Ca2+的细胞外液中,可使活化和未活化的细胞内的Ca2+浓度上升,且活化后的细胞内的Ca2+浓度上升更显著,与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)在无Ca2+的细胞外液中,活化和未活化的细胞内的Ca2十浓度未见明显变化,与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。3、浓度为5μM/L,10μM/L,50μM/L,,100μM/L的钛离子,作用活化的T细胞24小时,细胞内IP3表达上调,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。不同浓度之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。未活化的细胞,钛离子作用后,细胞内IP3表达下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。不同浓度之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。4、浓度为5μM/L,10μM/L,50μM/L的钛离子,作用活化的T细胞24小时,细胞内PLCγ1的磷酸化水平上升,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)：不同浓度之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。未活化的细胞,钛离子作用后,PLCγ1的磷酸化水平下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：1、钛离子浓度低于100μM/L时,可活化增殖T细胞。2、钛离子可使活化的T细胞内的Ca2+浓度、IP3表达增加及PLCγ1磷酸化水平升高。
【关键词】：钛离子 T细胞 Ca~(2+) IP_3 PLCγ1
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 个人简历4-6
• 主要英文缩写词索引6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 实验一 钛离子对T细胞增殖活性的影响14-22
• 1.材料和方法14-16
• 2.结果16-18
• 3.讨论18-21
• 4.结论21-22
• 实验二 钛离子对T细胞胞内游离Ca~(2+)的影响22-28
• 1.材料和方法22-24
• 2.结果24-26
• 3.讨论26-27
• 4.结论27-28
• 实验三 钛离子对T细胞内IP_3和PLC γ1表达的影响28-41
• 1.材料和方法28-32
• 2.结果32-35
• 3.讨论35-40
• 4.结论40-41
• 全文小结41-42
• 参考文献42-47
• 文献综述47-64
• 参考文献56-64
• 致谢64-65
• 攻读学位期间发表的论文65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：318184