串联黄色荧光蛋白在大鼠神经细胞中表达
发布时间:2017-04-24 03:05
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【摘要】:神经连接组学是一门新兴学科,是研究和绘制出大脑神经细胞连接(即突触)的图谱。神经连接组学要解决的首要问题是神经细胞的高亮度和高精度标记,以致于成像设备能采集到树突棘和轴突末梢。本课题组探索神经细胞的分子标记技术。为了实现高亮度标记,构建了多种串联黄色荧光蛋白质粒;为了实现标记树突棘,构建了带有定位序列的荧光蛋白质粒。作者将在培养的神经细胞中鉴定这些质粒是否能实现目的。 人们已经建立了胎鼠神经细胞的体外培养方法,作者获得了多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒。课题的目的是观察多种荧光蛋白质粒在神经细胞中的表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒在神经细胞中的表达。实验探索是否荧光蛋白的亮度提高,是否荧光蛋白在神经纤维中表达。通过查阅文献和练习,借鉴本实验室胎鼠神经细胞体外培养方法,掌握了神经细胞的体外培养方法,培养了神经细胞,获得了生长状态良好的神经细胞。通过查阅文献,采用脂质体转染神经细胞的方法,转染了Hela细胞和神经细胞,使用荧光显微镜观察荧光蛋白表达情况。结果观察到神经细胞和Hela细胞表达荧光蛋白,观察到荧光蛋白定位于神经细胞突起上的纤维状结构,表明多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒在离体培养的神经细胞中正常表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒能在神经细胞突起上的纤维状结构中表达。本文结论多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒可能在神经细胞中正常表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒可能能标记神经细胞突起上的纤维状结构。
【关键词】:神经细胞 离体培养 黄色荧光蛋白质粒 脂质体转染 神经纤维
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R318.04
【目录】:
- 摘要4-5
- Abstract5-9
- 1 绪论9-16
- 1.1 总结嗅觉通路标记技术9-13
- 1.2 简介荧光蛋白应用13-14
- 1.3 论文研究的主要内容14-16
- 2 神经细胞的培养16-26
- 2.1 材料与仪器16-17
- 2.2 实验方法与操作17
- 2.3 实验结果17-18
- 2.4 讨论18-26
- 3 串联黄色荧光蛋白重组质粒在神经细胞中的表达26-35
- 3.1 材料26
- 3.2 方法,结果26-30
- 3.3 讨论30-35
- 4 串联黄色荧光蛋白重组质粒在神经细胞中的定位表达35-49
- 4.1 材料36
- 4.2 方法,结果36-45
- 4.3 讨论45-49
- 5 总结与展望49-51
- 5.1 总结49
- 5.2 展望49-51
- 致谢51-52
- 参考文献52-55
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 刘默芳,王恩多,server.shcnc.ac.cn;绿色荧光蛋白[J];生物化学与生物物理进展;2000年03期
2 李艳玲;李向宁;周炜;曾绍群;刘曼;骆清铭;;培养海马神经元网络学习模型的构建[J];生物化学与生物物理进展;2007年02期
3 杨杰;张智红;骆清铭;;荧光蛋白研究进展[J];生物物理学报;2010年11期
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本文编号:323454
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