不同分子量丝素蛋白对UVB防护作用的研究
发布时间：2021-08-02 21:32
目的:研究不同分子量丝素蛋白对人永生化表皮细胞的增殖作用、紫外防护作用和对大鼠的UVB防护作用。方法:1. 将提取出来的丝素蛋白依据正交试验分组出来的不同条件用碱性蛋白酶降解,得出不同分子量的丝素蛋白;2. MTT法检测UVB对Ha Ca T细胞的损伤实验的最佳剂量;MTT法检测丝素蛋白对Ha Ca T细胞增殖的最佳浓度;3. MTT法检测不同组丝素蛋白对Ha Ca T细胞的增殖影响。4. 建立Ha Ca T细胞UVB损伤模型。将Ha Ca T细胞以1×104个/cm2的密度接种于培养板上,当细胞生长到密度为70%以上时（约72 h）,将培养板取出,以备实验检测,辐射剂量为130m J/cm2（1.97m W/cm2,66s）。5. 不同分子量组丝素蛋白对Ha Ca T细胞UVB损伤修复的影响细胞实验分七组:Control组、Damage组、SF组、MW1<3000Da组、MW=3.0×104Da组、MW12<3000 Da组、MW=8.0×103
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度丝素蛋白对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05)
21不同组丝素蛋白作用于HaCaT细胞后用MTT法检测HaCaT细胞增殖情况，检测结果示，丝素蛋白能促进HaCaT细胞的增殖活性，不同分子量丝素蛋白效果有所不同。与空白对照组相比，各组丝素蛋白均促进HaCaT细胞增殖，其中MW1<3000组的丝素蛋白明显促进HaCaT细胞增殖，其作用最强（P<0.05）；降解后丝素蛋白实验组MW1<3000组与未降解丝素蛋白SF组相比促进HaCaT细胞增殖的效果更为明显（P<0.05）。其它降解后丝素蛋白实验组与未降解丝素蛋白SF组相比，促进HaCaT细胞增殖的效果略高于SF组，但差异不够明显，无统计学意义（如图2）。è′j图2不同分子量组丝素蛋白对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05，□P<0.05)Fig.2EffectsofdifferentMWgroupofsilkfibroinonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.□representforcomparingwiththeSFgroupP<0.05.2不同分子量丝素蛋白对HaCaT细胞的紫外防护作用2.1MTT法检测UVB对HaCaT细胞的损伤实验的最佳剂量通过MTT法检测可发现UVB对HaCaT细胞增殖的影响比较明显。如结果示，和无UVB辐射对照组比较，UVB辐射量130mj/cm2、150mj/cm2(P<0.05)分别降低HaCaT细胞存活率到71%和50%，呈剂量依赖性；UVB辐射量110mj/cm2HaCaT细胞存活率到85%，但差异不够
22明显，无统计学意义。由于本实验的细胞凋亡情况不可以太大，选择辐射剂量130mJ/cm2为UVB细胞损伤模型的辐射剂量（如图3）。图3不同组UVB剂量对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05，□P<0.05)Fig.3EffectsofdifferentUVBirradiationonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.2.2MTT法检测不同分子量组丝素蛋白对HaCaT细胞UVB损伤修复的影响UVB辐射Damage组与正常对照Control组相比，UVB辐射显著性抑制了HaCaT细胞的活性；丝素防护实验组与UVB辐射Damage组相比，丝素给药后，HaCaT细胞的存活率显著提高（如图4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]龙血竭胶囊对SD大鼠放射性皮肤损伤防护作用及机制的初步研究[J]. 许明君,郭海亮,袁军,王金凤,邓永双,罗彬彬,李玉磊. 赣南医学院学报. 2019(05)
[2]两种酶水解制备丝素肽的抗菌性及对人胚肾细胞的毒性分析[J]. 成希飞,杨沙,陈果,赵一萍,彭娅林,周游,徐立. 食品与发酵工业. 2019(06)
[3]聚赖氨酸修饰丝素蛋白膜对神经干细胞生长和分化的影响[J]. 赵晓阳,邓立志,邓宇斌,万勇,张黎明. 生物工程学报. 2018(10)
[4]淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞凋亡和骨架的影响[J]. 刘迎节,侍才洪,陈凡平,郝宝辉,李昊,李军,徐云强,李瑞欣,张西正. 医用生物力学. 2017(04)
[5]不同浓度载万古霉素半水硫酸钙/丝素微球复合人工骨材料的制备及性能研究[J]. 刘力明,连小洁,刘世超,吴亚丽,黄棣,王晓君,王秀梅,崔福斋. 生物医学工程学杂志. 2016(05)
[6]金花葵总黄酮对老龄大鼠皮肤中HYP,GSH及SOD的影响[J]. 雷波,刘长征. 中国皮肤性病学杂志. 2011(02)
[7]实用光老化动物模型建立方法的探讨[J]. 郭鲁义,李春雨,张宁,杨智荣. 中国美容医学. 2008(02)
[8]多孔丝素膜的研制及性能研究[J]. 李明忠,吴徵宇,卢神州,贾生贤,姚敏. 丝绸. 2001(03)
[9]丝素蛋白对表皮细胞生长的影响[J]. 姚敏,贾生贤,金曙雯,陆树良,吴徵宇,朱德安. 西北国防医学杂志. 1999(04)
[10]丝素肽在化妆品中的应用研究[J]. 盛家镛. 苏州丝绸工学院学报. 1990(04)
博士论文
[1]广藿香油对UV所致小鼠皮肤光老化模型保护作用的实验研究[D]. 林荣锋.广州中医药大学 2015
[2]丹参酮IIA抑制UVB照射诱导的HaCaT细胞急性损伤的研究[D]. 吴侃.北京协和医学院 2014
本文编号：3318311
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度丝素蛋白对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05)
21不同组丝素蛋白作用于HaCaT细胞后用MTT法检测HaCaT细胞增殖情况，检测结果示，丝素蛋白能促进HaCaT细胞的增殖活性，不同分子量丝素蛋白效果有所不同。与空白对照组相比，各组丝素蛋白均促进HaCaT细胞增殖，其中MW1<3000组的丝素蛋白明显促进HaCaT细胞增殖，其作用最强（P<0.05）；降解后丝素蛋白实验组MW1<3000组与未降解丝素蛋白SF组相比促进HaCaT细胞增殖的效果更为明显（P<0.05）。其它降解后丝素蛋白实验组与未降解丝素蛋白SF组相比，促进HaCaT细胞增殖的效果略高于SF组，但差异不够明显，无统计学意义（如图2）。è′j图2不同分子量组丝素蛋白对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05，□P<0.05)Fig.2EffectsofdifferentMWgroupofsilkfibroinonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.□representforcomparingwiththeSFgroupP<0.05.2不同分子量丝素蛋白对HaCaT细胞的紫外防护作用2.1MTT法检测UVB对HaCaT细胞的损伤实验的最佳剂量通过MTT法检测可发现UVB对HaCaT细胞增殖的影响比较明显。如结果示，和无UVB辐射对照组比较，UVB辐射量130mj/cm2、150mj/cm2(P<0.05)分别降低HaCaT细胞存活率到71%和50%，呈剂量依赖性；UVB辐射量110mj/cm2HaCaT细胞存活率到85%，但差异不够
22明显，无统计学意义。由于本实验的细胞凋亡情况不可以太大，选择辐射剂量130mJ/cm2为UVB细胞损伤模型的辐射剂量（如图3）。图3不同组UVB剂量对HaCaT细胞增殖的影响(*P<0.05，□P<0.05)Fig.3EffectsofdifferentUVBirradiationonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.2.2MTT法检测不同分子量组丝素蛋白对HaCaT细胞UVB损伤修复的影响UVB辐射Damage组与正常对照Control组相比，UVB辐射显著性抑制了HaCaT细胞的活性；丝素防护实验组与UVB辐射Damage组相比，丝素给药后，HaCaT细胞的存活率显著提高（如图4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]龙血竭胶囊对SD大鼠放射性皮肤损伤防护作用及机制的初步研究[J]. 许明君,郭海亮,袁军,王金凤,邓永双,罗彬彬,李玉磊. 赣南医学院学报. 2019(05)
[2]两种酶水解制备丝素肽的抗菌性及对人胚肾细胞的毒性分析[J]. 成希飞,杨沙,陈果,赵一萍,彭娅林,周游,徐立. 食品与发酵工业. 2019(06)
[3]聚赖氨酸修饰丝素蛋白膜对神经干细胞生长和分化的影响[J]. 赵晓阳,邓立志,邓宇斌,万勇,张黎明. 生物工程学报. 2018(10)
[4]淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞凋亡和骨架的影响[J]. 刘迎节,侍才洪,陈凡平,郝宝辉,李昊,李军,徐云强,李瑞欣,张西正. 医用生物力学. 2017(04)
[5]不同浓度载万古霉素半水硫酸钙/丝素微球复合人工骨材料的制备及性能研究[J]. 刘力明,连小洁,刘世超,吴亚丽,黄棣,王晓君,王秀梅,崔福斋. 生物医学工程学杂志. 2016(05)
[6]金花葵总黄酮对老龄大鼠皮肤中HYP,GSH及SOD的影响[J]. 雷波,刘长征. 中国皮肤性病学杂志. 2011(02)
[7]实用光老化动物模型建立方法的探讨[J]. 郭鲁义,李春雨,张宁,杨智荣. 中国美容医学. 2008(02)
[8]多孔丝素膜的研制及性能研究[J]. 李明忠,吴徵宇,卢神州,贾生贤,姚敏. 丝绸. 2001(03)
[9]丝素蛋白对表皮细胞生长的影响[J]. 姚敏,贾生贤,金曙雯,陆树良,吴徵宇,朱德安. 西北国防医学杂志. 1999(04)
[10]丝素肽在化妆品中的应用研究[J]. 盛家镛. 苏州丝绸工学院学报. 1990(04)
博士论文
[1]广藿香油对UV所致小鼠皮肤光老化模型保护作用的实验研究[D]. 林荣锋.广州中医药大学 2015
[2]丹参酮IIA抑制UVB照射诱导的HaCaT细胞急性损伤的研究[D]. 吴侃.北京协和医学院 2014
本文编号：3318311
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3318311.html
