TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘的研制

发布时间：2017-04-30 03:05

  本文关键词：TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘的研制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：一、研究背景 屈指肌腱损伤后愈合发生粘连常常导致手指的关节活动受限,目前仍是手外科术后常见的并发症，往往需要再次手术治疗。尽管随着材料和手术技术、康复手段的进步，，如何减少肌腱损伤愈合后粘连仍然面临挑战。研究发现有滑膜鞘肌腱在抗粘连方面明显优于无滑膜鞘肌腱，滑膜鞘通过分泌滑液给肌腱提供营养，同时通过自身分泌的细胞因子来减少瘢痕形成，但其数量少、取材会对局部组织造成损伤，如果使用人工肌腱也面临着免疫排斥反应等问题。如果我们对无滑膜鞘或滑膜鞘损伤的肌腱给予人工化改造，制备组织工程滑膜鞘，将有可能大大减少肌腱损伤愈合后粘连问题。 近年来，转化生长因子-β (transforming growth factor-β，TGF-β)家族在瘢痕形成过程中的作用被越来越重视，TGF-β被认为是肌腱损伤后粘连、瘢痕形成的关键因子。研究发现在皮肤损伤愈合过程中，加入转化生长因子TGF-β1,2的中和抗体或增加TGF-β3的量能有效减少瘢痕的形成。TGF-β3在减少瘢痕形成的治疗中被认为是有效和可行的。 壳聚糖是几丁质部分脱乙酰基的产物，在自然界中广泛存在，壳聚糖溶液中带有高密度的正电荷，可以与多种水溶性的阴离子物质结合，并可以用来制备壳聚糖微球、纤维和多孔支架。壳聚糖具有良好的生物相容性和生物可降解性，在体内可被溶菌酶等酶解成低聚糖，降解产物能被生物体完全吸收。 本研究拟利用壳聚糖微球负载TGF-3，构建负载缓释TGF-3微球的壳聚糖组织工程支架，然后种植滑膜细胞，构建TGF-3缓释组织工程滑膜鞘，并检测其生物相容性。本研究将为肌腱粘连的防治提供新的理论依据和实验基础，将可能为临床手外科屈指肌腱粘连的防治提供有效的方法。 二、研究目的 通过制备负载转化生长因子β3(TGF-β3)的缓释组织工程滑膜鞘，探索减少肌腱损伤愈合后粘连的新方法。 三、研究内容 1.采用乳化交联法制备负载TGF-β3的壳聚糖缓释微球，扫描电镜观察并检测其体外缓释效果。 2.利用冷冻干燥法制备壳聚糖三维支架，将壳聚糖微球引入支架，扫面电镜观察。 3.将滑膜细胞收集后种植于含TGF-β3微球的壳聚糖三维支架，MTT法检测微球和支架材料对滑膜细胞增殖的影响，检验材料和细胞的体外相容性。 四、结果 1.壳聚糖微球扫描电镜下观察呈球状，平均粒径28.5±4.3μ m。 2.对微球缓慢释放TGF-3进行连续监测7天，累积总释放率为46.2％±0.3%。 3.壳聚糖三维支架扫面电镜观察孔隙较为一致，孔隙直径平均180.4±35.3μ m，孔隙率83.2％±0.6%。微球可均匀扩散并嵌入到支架中。 4.滑膜细胞在支架和微球间生长良好。MTT法检测TGF-β3微球和支架不影响滑膜细胞正常生长增殖，材料体外相容性较好(p0.05)。 五、结论 本研究验证了负载TGF-β3的微球体外缓释效果良好，材料和滑膜细胞具有良好的生物相容性，组织工程滑膜鞘为减少肌腱损伤愈合后粘连提供了新方法。
【关键词】：壳聚糖 转化生长因子β3 滑膜鞘 肌腱损伤 粘连
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 缩略语表5-6
• Abstract6-9
• 摘要9-11
• 第一章 前言11-14
• 1.1 选题缘由11
• 1.2 研究背景11-12
• 1.3 研究意义12
• 1.4 研究内容12-13
• 1.5 研究方法13-14
• 第二章 负载 TGF-β3 壳聚糖微球的制备及缓释效果研究14-24
• 2.1 前言14-15
• 2.2 材料与方法15-19
• 2.3 结果19-21
• 2.4 讨论21-23
• 2.5 小结23-24
• 第三章 壳聚糖不对称膜的制备、形态学观察及水结合能力的测定24-29
• 3.1 前言24
• 3.2 材料与方法24-26
• 3.3 结果26-27
• 3.4 讨论27-28
• 3.5 小结28-29
• 第四章 TGF-β3 缓释组织工程滑膜鞘的制备及观察29-38
• 4.1 前言29
• 4.2 材料与方法29-33
• 4.3 结果33-36
• 4.4 讨论36-37
• 4.5 小结37-38
• 全文总结38-39
• 参考文献39-46
• 文献综述46-54
• 参考文献51-54
• 攻读学位期间的论文和专利54-55
• 致谢55

【参考文献】

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本文编号：336102