人脐带间充质干细胞和乳鼠雪旺细胞复合壳聚糖/NT-3支架材料修复大鼠脊髓损伤的实验研究

发布时间：2021-09-04 18:01

　　目的：通过酶消化法在体外利用人脐带及乳鼠坐骨神经分离出脐带间充质干细胞和雪旺细胞并进行传代培养和鉴定，在体外与材料复合构建出壳聚糖-NT3细胞复合支架材料，并将其植入构建好的大鼠脊髓横断损伤模型中，通过设置相应的对照组及相关检测指标，检测细胞复合支架材料对大鼠脊髓横断损伤的修复效果。方法:以人脐带为取材来源，采用经典胶原酶消化法分离出脐带间充质干细胞，传代培养，显微镜下观察细胞形态，绘制增殖曲线，用流式细胞仪进行表面抗原鉴定。以SD新生乳鼠的坐骨神经分离出雪旺细胞并传代，以免疫组织化学方法和光学显微镜观察细胞形态进行鉴定。将传代后的脐带间充质干细胞和雪旺细胞与壳聚糖-NT3支架（由暨南大学理工学院提供）复合，构建出细胞复合材料，设计相应的动物实验分组，按分组情况植入相应植入物，经行为学、影像学、组织学等评估脊髓损伤的治疗效果。结果:以酶消化法成功从脐带中分离培养出间充质干细胞，并经细胞形态观察、流式检测鉴定显示所提取细胞均高度表达间充质干细胞的标记（CD73、CD90、CD105）和黏附分子标记（CD54、CD44、CD29、）不表达造血干细胞标记（CD45、CD40、CD34）和人类... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人脐带间充质干细胞的生长曲线

16图2-6 流式鉴定流式细胞仪检测人脐带间充质干细胞的表面标志显示：脐带干细胞均统一高表达间充质干细胞的表面标记（CD73、CD90、CD105）和黏附分子标记（CD54 、CD44、CD29、），不表达造血干细胞标记（CD45、CD40、CD34）和人类白细胞抗原标记（HLA-DR）

术后4周各组横断位MRI图像

【参考文献】：
期刊论文
[1]神经干细胞移植在脊髓损伤患者中的应用价值探讨[J]. 陈文斗,玉石,谢乔林,黄锦丰,宾杰.  中国实用神经疾病杂志. 2013(19)
[2]脐带间充质干细胞研究现状与临床治疗[J]. 王艳,张晋林,黄晓兵,张潇潇,朱一帆.  重庆医学. 2013(18)
[3]脐带源与骨髓源干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的疗效比较[J]. 陆士奇,孙海伟,刘励军,张洪高,郭凌川,惠国桢.  中华神经外科杂志. 2013 (01)
[4]雪旺细胞体外培养与纯化的研究进展[J]. 付红运,王锐英.  海南医学. 2012(22)
[5]干细胞移植治疗脊髓损伤18例[J]. 侯会荣,陆红岩,郑利星.  脑与神经疾病杂志. 2012(03)
[6]人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞联合培养的实验研究[J]. 朱玉海,冯世庆.  天津医药. 2012(03)
[7]胚胎干细胞诱导成神经细胞的研究进展[J]. 秦厉梅,刘黎青,周盛年,王媛.  中国老年学杂志. 2012(04)
[8]壳聚糖在脊髓损伤中的作用[J]. 李广峰,杨建东.  中国矫形外科杂志. 2011(24)
[9]双向差速法制备高纯度雪旺细胞的实验研究[J]. 刘炎,张莉,宫旭,陈继凤,王玉,赵斌,任志午,詹胜峰,许文静,彭江,卢世璧.  中国矫形外科杂志. 2011(16)
[10]胚胎干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 徐乐勤,丁道芳,李晓锋,王拥军,施杞,周重建.  中国康复理论与实践. 2011(01)



本文编号：3383744