光诱导一氧化氮的定量释放及其光生物学应用

发布时间：2017-05-03 09:06

  本文关键词：光诱导一氧化氮的定量释放及其光生物学应用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：一氧化氮(NO)作为重要的信号转递分子,在多种生理过程包括心血管系统,神经系统以及免疫响应和细胞凋亡中具有重要的作用。近年来随着光生物学和光动力学治疗的快速发展,光活性的NO供体受到研究者越来越多的关注。如何把NO输送到特定的生理靶位,以及定时定量的控制NO的释放具有重要的意义。而光物理和光化学的方法具有更多的优点：比如可以方便地控制时间、剂量、特定的位置释放,从而达到有效调控生理过程的目的。由于特殊的光反应性和稳定性,钌与一氧化氮{Ru-NO}的配合物受到研究者特别的关注。特异性光敏感的{Ru-NO}配合物的发现和利用,对于NO供体的设计,生理过程的调控以及开发疾病治疗新的方法均具有重要的意义。在本文中,我们利用多种测定NO自由基的方法,定量地测定了不同构型cis和trans-[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物,在不同光激发条件下NO自由基的解离及其释放量；比较研究了该类配合物与生命遗传信息载体-DNA分子之间的结合和作用；探究了该类配合物在光照条件下对不同肿瘤细胞株细胞生长的抑制活性。获得了通过调节光激发,定量地调控不同构型[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物释放NO的基本方法,建立了通过光照射不同构型[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物,提高其对肿瘤细胞生长活性抑制的实验方法。本文主要研究内容包括：一、介绍和总结了NO的生理作用及其相关的研究进展状况,分析了近年来光诱导NO自由基的解离反应。二、利用电子顺磁共振(EPR)技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),证实了光诱导不同构型cis和trans-[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物中NO自由基的解离和NO自由基的释放。利用NO选择性电极定量测定了不同光照条件下NO自由基的释放量。三、利用荧光光谱法研究了不同构型cis和trans-[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物与CT-DNA的结合作用,并计算了其猝灭常数。阐明了光照条件下,不同构型[Ru(OAc)(2mqn)2NO]配合物对pBR322DNA切割的机制。四、利用标准MTT法测定和分析了,在无光照条件和光照条件下,不同构型cis和trans-[Ru(OAc)(2mqn)2NO]]配合物对Hela, HepG2和C6肿瘤细胞生长的抑制活性。
【关键词】：钌配合物 一氧化氮 DNA 细胞 光照射 光反应
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R318.51
【目录】：

• 中文摘要10-12
• ABSTRACT12-14
• 第一章 绪论14-19
• 1.1 课题研究目的和意义14
• 1.2 光诱导一氧化氮的解离反应14-18
• 1.2.1 光动力疗法14-15
• 1.2.2 {Fe-NO}型配合物的光解离反应15
• 1.2.3 {Ru-NO}型配合物的光解离反应15-18
• 1.3 本论文主要内容和贡献18-19
• 第二章 光诱导NO的解离及NO的检测19-35
• 2.1 引言19
• 2.2 电子顺磁共振(EPR)技术19-25
• 2.2.1 电子顺磁共振(EPR)技术的基本原理19-21
• 2.2.2 实验所用仪器和试剂21
• 2.2.3 EPR波谱测定21-22
• 2.2.4 结果与讨论22-25
• 2.3 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术25-26
• 2.3.1 基本原理25
• 2.3.2 测定仪器25
• 2.3.3 MALDI-TOF-MS质谱测定25
• 2.3.4 结果与讨论25-26
• 2.4 照射光源的构建26-27
• 2.5 NO选择性电极法27-34
• 2.5.1 NO选择性电极法测定的原理27
• 2.5.2 实验所用仪器和试剂27-29
• 2.5.3 NO电极的校准29-30
• 2.5.4 NO的测定30-33
• 2.5.5 结果与讨论33-34
• 2.6 本章总结34-35
• 第三章 光诱导不同构型{Ru-NO}配合物对DNA的作用35-46
• 3.1 引言35-36
• 3.2 荧光光谱法研究[Ru(OAc)(2mqn)_2NO]与DNA的结合作用36-39
• 3.2.1 实验原理36-37
• 3.2.2 实验所用仪器与试剂37
• 3.2.3 实验过程37-38
• 3.2.4 结果与讨论38-39
• 3.3 琼脂糖凝胶电泳法39-45
• 3.3.1 实验原理40
• 3.3.2 实验仪器与试剂40-41
• 3.3.3 实验过程41
• 3.3.4 实验结果及分析41-45
• 3.4 本章总结45-46
• 第四章 光诱导不同构型{Ru-NO}配合物对癌细胞生长的抑制作用46-52
• 4.1 引言46-47
• 4.2 MTT法原理47
• 4.3 实验部分47-51
• 4.3.1 实验所用仪器与试剂47-48
• 4.3.2 试剂配置48
• 4.3.3 细胞培养48-49
• 4.3.4 MTT法测定[Ru(OAc)(2mqn)_2NO]配合物对肿瘤细胞生长的影响49-50
• 4.3.5 实验结果及分析50-51
• 4.4 总结51-52
• 第五章 总结与展望52-54
• 参考文献54-59
• 攻读学位期间取得的研究成果59-60
• 致谢60-61
• 个人简况及联系方式61-62
• 承诺书62-63

【共引文献】

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 袁林;新型氧杂蒽类荧光染料与荧光探针的设计、合成与成像应用研究[D];湖南大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 张云凤;一氧化氮在ALA光动力诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的作用研究[D];扬州大学;2013年

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本文编号：342701