双层猪小肠粘膜下层脱细胞胶原/PLGA静电纺丝复合膜载荷PFTα提高成骨作用的实验研究
发布时间：2021-11-02 20:15
第一部分PFTα诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的机制研究目的探索PFTα诱导成骨分化的作用机制方法本研究采用CCK-8检测PFTα对MC3T3-E1细胞毒性,筛选PFTα诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的最佳浓度。细胞经PFTα处理后,real-time PCR、westernblot、免疫荧光法检测细胞内NOX4水平,流式细胞仪检测ROS水平。制备并筛选siNOX4i并将siNOX4转染细胞,观察干扰NOX4后PFTα对MC3T3-E1细胞成骨诱导的作用机制。分别予细胞ALP、茜素红染色观察成骨情况;qPCR,WB、IF检测Nox4;流式检测ROS的表达。结果PFTα能显著提高MC3T3-E1细胞成骨分化。在10-80μmol范围内随着PFTα浓度增高细胞活力下降。同时,随着PFTα浓度增加,NOX4和ROS水平也逐步增加,成骨能力提升。在转染si-NOX4的细胞后,PFTα增加NOX4-ROS的作用和促进成骨的作用明显受到抑制。结论PFTα通过PFTα-NOX4-ROS通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化第二部分SIS-ECM/PLGA/PFTα,复合膜体外诱导MC3T3-E1细...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ｐ５３的基本结构间??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｂａｓｉｃ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐ５３??
?博士学位论文???３．实验结果??３．１?ＣＣＫ８检测药物对细胞活性的影响??对不同浓度的ＰＦＴａ细胞毒性进行筛眩按照５?ｎＭ，?１０?｜ｉＭ，２０?ｐＭ，?４０?ｐＭ，??８０?ｎＭ的浓度进行配置，ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞经不冋浓度的ＰＦＴａ处理２４小时后，检??测细胞活性情况。如图１－２?ＣＣＫ８在４５０ｎｍ处ＯＤ值所示：与对照组（ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１）??相比，随着ＰＦＴａ浓度增加，ＯＤ数值逐渐减小：细胞相对增值率如表１－３：与对??照组相比，５ｐＭ，?ｌＯｐＭ，２０ｐＭ组细胞增殖率较高，均大？丁－８０％，４０ｐＭ组??６１．８°／。，８０ｐＭ组细胞增殖率＜５０％。Ｉｆｌ丨细胞毒性：５（ｉＭ，１０ｐＭ，２０ｐＭ为１级，??４０?为２级，８０ｐＭ３级，冈此在８０?ｐＭ细胞的毒性作用已经显著增加。??Ｅ?１．〇１?＊??ｃ?｜?１?，?■?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１??養?０．８－?＾?１?｜??ＷＭ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋５ｍＭ?ＰＦＴａ??？?Ｈ｜?ｔ?＊?■?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?＋?１０＿?ＰＦＴａ??Ｂｉ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋２０（ＪＭ?ＰＦＴａ??｜?Ｂ｜?ｍ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋４０（ｊＭ?ＰＦＴａ??ｉｌｌｌＵＵ??＾?＾?＜Ｃ＞?／??？。令。令０?士??图１－２不同浓度的ＰＦＴｃｔ处理ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞后，ＣＣＫ８法检测细胞毒性。随着浓度的增加，??细胞的活性下降。数据以Ｍ土ＳＤ：＊ｐ＜（）．（）５。??Ｆｉｇ．?１－２?ＣＣＫ８?ｗａｓ?ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ?ｔｏ?ｔｅｓｔ?ｔｈｅ?ｃ＞?ｔｏｔｏ＼ｉｃｉｔｙ?ｏｆ?ＰＦＴａ?ｕｓｅｄ?ｉｎ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?ｃｅｌｌｓ．?Ｗｉｔｈ?ｔｈｅ??ｉｎｃ
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本文编号：3472321
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ｐ５３的基本结构间??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｂａｓｉｃ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐ５３??
?博士学位论文???３．实验结果??３．１?ＣＣＫ８检测药物对细胞活性的影响??对不同浓度的ＰＦＴａ细胞毒性进行筛眩按照５?ｎＭ，?１０?｜ｉＭ，２０?ｐＭ，?４０?ｐＭ，??８０?ｎＭ的浓度进行配置，ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞经不冋浓度的ＰＦＴａ处理２４小时后，检??测细胞活性情况。如图１－２?ＣＣＫ８在４５０ｎｍ处ＯＤ值所示：与对照组（ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１）??相比，随着ＰＦＴａ浓度增加，ＯＤ数值逐渐减小：细胞相对增值率如表１－３：与对??照组相比，５ｐＭ，?ｌＯｐＭ，２０ｐＭ组细胞增殖率较高，均大？丁－８０％，４０ｐＭ组??６１．８°／。，８０ｐＭ组细胞增殖率＜５０％。Ｉｆｌ丨细胞毒性：５（ｉＭ，１０ｐＭ，２０ｐＭ为１级，??４０?为２级，８０ｐＭ３级，冈此在８０?ｐＭ细胞的毒性作用已经显著增加。??Ｅ?１．〇１?＊??ｃ?｜?１?，?■?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１??養?０．８－?＾?１?｜??ＷＭ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋５ｍＭ?ＰＦＴａ??？?Ｈ｜?ｔ?＊?■?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?＋?１０＿?ＰＦＴａ??Ｂｉ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋２０（ＪＭ?ＰＦＴａ??｜?Ｂ｜?ｍ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１＋４０（ｊＭ?ＰＦＴａ??ｉｌｌｌＵＵ??＾?＾?＜Ｃ＞?／??？。令。令０?士??图１－２不同浓度的ＰＦＴｃｔ处理ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞后，ＣＣＫ８法检测细胞毒性。随着浓度的增加，??细胞的活性下降。数据以Ｍ土ＳＤ：＊ｐ＜（）．（）５。??Ｆｉｇ．?１－２?ＣＣＫ８?ｗａｓ?ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ?ｔｏ?ｔｅｓｔ?ｔｈｅ?ｃ＞?ｔｏｔｏ＼ｉｃｉｔｙ?ｏｆ?ＰＦＴａ?ｕｓｅｄ?ｉｎ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?ｃｅｌｌｓ．?Ｗｉｔｈ?ｔｈｅ??ｉｎｃ
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